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胰腺癌动物模型制作及药物干预效应的研究

朱功兵

  目的:通过化学致癌剂二甲基苯并蒽(DMBA)诱导Sprague-Dawley(SD)大鼠原位胰腺癌模型,寻找出一个较理想的胰腺癌模型制作方法。采用免疫组织化学方法检测获得的实验大鼠胰腺组织标本K-ras、p53、Smad4表达的动态变化过程,从而探讨胰腺导管腺癌的发病机制。另用人体胰腺癌细胞株,建立人胰腺癌荷瘤裸鼠异位模型,探讨鼠抗人EGFR单克隆抗体联合5-Fu、健择对移植胰腺癌的干预效应。方法:将220只SD大鼠(体重150~200g,雄性),根据术中二甲基苯并蒽(DMBA)用量的不同,随机分为胰腺癌模型组Ⅰ(6mg组,80只)和胰腺癌模型组Ⅱ(9mg组,80只)和对照组(60只)。10%水合氯醛(0.3ml/kg体重)腹腔内注入麻醉,每组动物均经上腹正中切口2cm进腹。胰腺癌模型组Ⅰ和组Ⅱ在解剖暴露清楚胰腺后,于胰体尾部切开胰腺被膜分别置入6mg、9mg的二甲基苯并蒽,6-0无损伤线荷包缝合包埋药物于胰腺内。在普通环境中饲养大鼠。对照组仅行胰腺被膜切开、6-0无损伤线荷包缝合胰腺:随时观察大鼠精神状况,每周称大鼠体重。于术后1月、2月、3月、4月、5月、6月、7月处死胰腺癌模型组大鼠(10只/次)、对照组大鼠(7只/次),观察腹腔及胰腺病变,切取胰腺标本。取部分胰腺组织固定于4%的多聚甲醛中,石腊包埋后制成4μm厚连续切片,用免疫组织化学抗生蛋白链菌素-生物素标记法(LSAB法)检测胰腺组织K-ras、p53、Smad4的表达。裸鼠在SPF洁净环境下饲养。将4×10~6人胰腺癌细胞株SW1990肿瘤细胞悬液0.2ml注射于裸鼠背部皮下,建立肿瘤模型。每周观察肿瘤生长情况,游标卡尺测量肿瘤体积,并详细记录;当肿瘤生长到150mm~3左右大小时,将裸鼠随机分成8组,每组6只;表皮生长因子受体(EGFR)在人胰腺癌内存在过度表达,胰腺癌细胞的生长和转移部分依赖表皮……   
[关键词]:胰腺癌;模型;表皮生长因子受体;单克隆抗体
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:新疆医科大学2005年