手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

肺癌相关基因的RNA干扰实验研究

朱中山

  目的:为了研究点突变的PP2Aα基因对单克隆抗体N-35相关蛋白N35表达的影响,探讨其作为肺癌基因治疗候选靶基因的可行性。方法:将云南个旧肺腺癌细胞系GLC-82作为靶细胞,点突变的PP2Aα基因作为靶基因,设计并构建shRNA质粒表达载体,通过阳离子脂质体导入GLC-82细胞,经G418筛选阳性克隆,采用蛋白质印迹法检测N35表达量的变化。结果:所有shRNA质粒表达载体均成功导入GLC-82细胞并能使它们在含G418培养基中长时间生长;转染了pGenesil-1-ZZS4和pGenesil-1-ZZS2的GLC-82细胞较未转染者N35表达都有减少,而前者更明显。结论:RNA干扰是一门有效且特异的基因沉默技术;shRNA质粒表达载体能介导RNA干扰,特异地抑制靶基因表达:点突变的PP2Aα基因是重要的肺癌相关基因,有望成为肺癌基因治疗的候选靶基因。……   
[关键词]:肺癌相关基因;RNA干扰;基因治疗;蛋白质印迹法
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:昆明医学院2005年