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高效毛细管电泳间接紫外光检测法的应用研究

陈冰

  本论文在高效毛细管电泳(HPCE)直接光检测分离分析植物激素的基础上,重点进行了非光活性物质间接光检测分离分析的研究。这些非光活性物质集中在食品添加剂和祖国医药领域,如氨基酸和胆汁酸、贝母类化合物等。研究间接光检测技术的目的在于拓宽高效毛细管电泳技术的应用。生长素和细胞激动素是两类重要的植物激素,常用的分离方法(HPLC和GC-MS等)只用于单一类激素的分离;本研究利用高效毛细管电泳将两类植物激素七组分进行了同时分离分析,即四种常见的生长素[吲哚—3—丁酸(IBA)、吲哚—3—丙酸(IPA)、吲哚—3—乙酸(IAA)和1—萘乙酸(NAA)]与三种细胞激动素[N~6—异戊烯腺嘌呤(即玉米素,ZT)、N~6—呋喃甲基腺嘌呤(KT)和6—苄氨基嘌呤(6-BAP)];且这七种组份均具有光活性,故采用直接紫外光检测法进行测定。在十二烷基硫酸钠(SDS)作胶束的体系中,首次用葡萄糖和三乙醇胺作混合改进剂,有效地改善了上述七种植物激素的分离度,13min内获得基线分离。本研究对混合改进剂的作用机理进行了详细讨论。氨基酸是组成蛋白质的基本单位,是常见的食品添加剂,常用的分离方法(滤纸层析、凝胶电泳和HPLC等)多只用于单一氨基酸的分离。本研究利用高效毛细管电泳将三种没有光活性的未衍生氨基酸[即鸟氨酸(Orn)、脯氨酸(Pro)和谷氨酰(Gln)]进行了同时分离分析,并采用具有较强信号的背景电解质对其进行间接紫外光检测。系统地研究了背景电解质种类和浓度对其间接紫外光检测灵敏度的影响,以及分离缓冲体系酸度和磷酸盐浓度对其高效毛细管电泳分离度的影响,确定了优化分离缓冲体系,11min内完成基线分离。采用该方法首次应用于实际样品(海天生抽、青岛啤酒和氨基酸口服液)中氨基酸的定量分析,为食品质量检测标准提供了新的研究方法。动物胆是常用的传统名贵中药,所含胆汁中的有效成份主要是胆汁酸,是一类疏水性极强的甾体化合物,其分析方法(比色法、TLC和HPLC等)多只用于单一胆汁酸的分离。本研究所分析的五种胆汁酸为胆酸……   
[关键词]:高效毛细管电泳;直接紫外光检测法;间接紫外光检测法;植物激素;氨基酸;胆汁酸;贝母类化合物
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京工业大学2004年