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不同品种马肌肉抑制素基因多态性研究

红海

  肌肉抑制素基因又称 GDF-8,是一种肌肉生长的负调控因子,属 TGF-β(转化生长因子-β)超家族。TGF 家族是一类分泌型的多肽,在细胞间起通讯介导作用。它可以改变成纤维细胞的表型,抑制细胞的过度增殖,诱导软骨形成,并且具有免疫作用。所以该基因一旦被发现就成为国内外学者研究的热点。目前对牛和猪 MSTN基因的研究十分广泛,早已发现双肌牛和瘦肉率较高的猪。对于马而言肌肉抑制素基因具有不仅可提高肉用马的经济效益,也与竞技马的竞技水平息息相关的。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)因其分布广泛、突变率较低成为继 RFLP 和微卫星标记之后的第 3 代分子标记。SNPs 的研究成为当前分子遗传学研究的热点之一。 本研究首先对检测 SNPs 的 PCR-SSCP 分析方法进行了探讨,以 320bp 的 PCR 扩增片段为例在凝胶组成、浓度、上样缓冲液的组成、甘油的比例以及电泳的条件等方面进行了优化。建立了一种片段在 300bp 左右的 PCR-SSCP 分析方法。以 MSTN 为候选基因,以乌审马、乌珠穆沁马、锡尼河马、三河马、纯血马、矮马等 6 个品种马为实验材料通过 PCR-SSCP 和 PCR-RFLP 分析技术对其 3 个外显子和包括完整的第一内含子在内的 2512bp 片段进行对比分析。PCR-SSCP 结果表明:第一外显子位于cDNA 序列第 95 处发生 G→A 和第 337 处的 A→G。两处碱基突变均引起了氨基酸的变异,即丝氨酸(AGT)→天冬酰氨(AAT)、苏氨酸(ACG)→丙氨酸(GCG)。第二外显子未检测到 SNPs 位点。第三外显子位于 cDNA 序列第 809 处发生 T→C 的转换。该突变也导致了氨基酸的变异,由亮氨酸(CTT) →脯氨酸(CCT)。PCR-RFLP 结果表明:该片段中没有 SrfI 酶酶切位点。ScaI,MspI,HhaI 等三种酶虽然有酶切位点,但未发现多态性。只有 DraⅠ酶具有多态性。……   
[关键词]:;肌肉抑制素基因;单核苷酸多态性;单连构象多态性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:内蒙古农业大学2005年