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斑地锦有效成分的药动药效学研究

邵留

  地锦草为大戟科植物地锦或斑地锦干燥的全草,为多年生草本植物,具有清热解毒、利湿退黄、活血止血、抗病原微生物等功能。现代研究表明,地锦草主要含可水解性鞣质类和槲皮素、山萘素等黄酮类化物;药理研究证明其具有抗菌、抗病毒、抗氧化、护肝、止血等生物活性。综上所述,地锦草作为一种廉价、丰富的可再生资源而且其中的有效成分有着广泛的应用前景、市场广阔,但现有资料对地锦草部分有效成分和方剂的研究,大部分还缺少作用环节或作用机制方面的深入探讨,提取物在鱼体内药效药动学方面的研究尚未见报道。本论文进行了斑地锦总黄酮提取工艺的优选,提取分离出斑地锦中的有效成分,研究了斑地锦总有效成分和没食子酸对鲫鱼细菌性败血症的治疗效果及其在鱼体内的药动学过程,并对斑地锦的抑菌作用及其安全性进行了研究。1、采用逐步比较及正交试验设计法优选斑地锦总有效成分的提取工艺。比较了两种溶液、两种提取方法对提取液总黄酮含量的影响,得出乙醇连续回流法提取效果最好,斑地锦总黄酮含量达10.455 mg/g。采用正交连续回流法提取,选用正交表L_9(3~4),考察不同浓度、提取次数、提取时间和溶剂加倍量对总黄酮含量的影响。结果表明各因素对试验结果的影响顺序为提取次数>提取时间>溶剂加倍量>乙醇浓度,根据方差分析得出最佳提取工艺为65%的乙醇12倍量提取4次,每次2h。2、采用薄层色谱法分析斑地锦总提取物中的主要成分,用薄层析硅胶GF254制板,以石油醚—乙酸乙酯—甲酸(50:50:0.6)为展开剂,在紫外光(254nm)下或采用氨熏方式在可见光下观察层析结果,得出斑地锦总提取物中含有槲皮素、山萘素、没食子酸等有效成分。采用薄层析和柱层析联用的方法,通过硅胶柱层析法,以石油醚—乙酸乙酯—甲酸(50:50:0.6)作为洗脱液进行洗脱,分离得到一种单体,通过理化性质等鉴定为没食子酸。3、选择温和气单胞菌为鱼类细菌性败血症代表菌种进行抑菌试验,结果得出斑地锦总有效成分对温和气单胞菌的最低抑菌浓度MIC为1.25mg/ml,最小杀菌浓度MBC为10mg/ml。没食子酸对温和气单胞菌有较强的抑菌效果,其MIC和MBC都为3mg/ml。斑地锦总提取物浓度为1200mg/ml、没食子酸浓度为96mg/ml条件下口灌0.5ml/50g,一星期内无任何不良反应,其口服LD_(50)未测出,表明斑地锦总有效成分及没食子酸在治疗浓度下对鱼体无任何毒性。4、采用口灌给药方式研究了斑地锦总提取物及没食子酸对鲫鱼细菌性败血症的治疗作用,结果表明治疗组与对照组相比死亡率差异显著(p<0.05),两个治疗组的效果差异不显著(p>0.05),说明其治疗作用明显。从鱼体各生化指标的变化得出斑地锦总提取物及没食子酸对病鱼的肝脏、肾功能受损状态有明显的改善作用。5、采用反相高效液相色谱法建立了鲫鱼血浆中没食子酸测定方法。高效液相色谱仪为……   
[关键词]:斑地锦;有效成分;没食子酸;提取分离;药效;药动
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:西南农业大学2005年