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我国小型猪内源性反转录病毒的检测与五指山毒株全长cDNA克隆的构建

阳玉彪

  猪内源性反转录病毒(PERV)为反转录病毒科(Retroviridae)哺乳动物C型反转录病毒属(Mammalian Type C Retroviridae)成员,它是以前病毒DNA的形式整合进猪细胞基因组中,并随细胞染色体复制而复制的反转录病毒。1997年,Patience等发现PERV在体外可以感染人的多种细胞,引起了人们对PERV与猪-人异种移植病原安全性的广泛关注。因此,本研究利用本实验室已建立的PERV检测方法对我国小型猪中PERV的存在情况进行调查,旨在筛选培育无PERV猪群,为异种移植提供安全可靠的供体源。我们采集了6个省市10个单位、7个品种、17个猪群259份血样,通过PCR检测发现:我国小型猪基因组中普遍存在PERV,其阳性率达100%。其中以B亚型最高(95.37%),其次为A亚型(67.18%)、C亚型(40.93%),目前为止没有筛选到无PERV的阴性猪个体。PERV主要结构蛋白基因gag、pol、env不仅在小型猪基因组中存在,而且都能够转录为RNA。除了检测不到PERV-C亚型病毒的表达外,大部分A、B亚型病毒都能够检测到表达,且A亚型的表达率高于B亚型。值得注意的是我国小型猪中各种PERV亚型病毒混合存在的现象十分普遍,有78.38%存在2种以上PERV亚型病毒混合感染。鉴于PERV存在的普遍性与广泛性,筛选培育天然无PERV猪群存在很……   
[关键词]:猪内源性反转录病毒;检测;全长cDNA;扩增;克隆
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:广西大学2005年