手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

磺胺二甲嘧啶胶体金免疫层析试纸条的研制

冯梁

  本研究将杂交瘤细胞株3G_7-E8接种到小鼠体内,采用体内诱生腹水法制备了磺胺二甲嘧啶(SM_2)单克隆抗体。该单抗经辛酸-硫酸铵法纯化后用包被抗原C进行质量鉴定,单抗浓度为8mg/ml,效价为1∶2.1×10~6,IC_(50)值为1.62ng/ml;所制备的SM_2单抗对SM_2、SDM、SM_1、SMM、SQX、SMZ、SD等磺胺类药物的交叉反应率分别为100%、23%、12%、1.6%、2.1%、0.1%、0.9%。本研究成功研制出磺胺二甲嘧啶(SM_2)胶体金免疫层析试纸条。检测试剂是喷涂在结合释放垫上的胶体金标记的SM_2单抗,捕获试剂为包被在硝酸纤维素膜上的SM_2-OVA耦联物。用该试纸条检测SM_2标准液,检测限为5ng/ml,检测添加了SM_2的猪尿样本,检测限为50ng/ml。试纸条交叉反应试验结果表明,该试纸条在猪尿样本中SM_2、SM_1、SDM三种药物的添加浓度高于50ng/ml时,检测结果都为阳性,可以用于猪尿样本中SM_2、SM_1、SDM三种药物的总残留检测。用已商品化的ELISA试剂盒和本研究制备的试纸条同时对48份猪尿样本进行了检测。结果表明,在所检测的48份猪尿样本中,ELISA试剂盒检测结果为阳性的有32份,阳性率为66.7%;试纸条检测结果为阳性的有33份,阳性率为68.8%。两种检测方法的阳性结果符合率为96.9%。该试纸条最大的优点是无需借助检测仪器,检测所需试剂都已事先包被在试纸条上,检测快速、简便,10min内可出检测结果,适用于对磺胺类药物残留进行现场检测。本研究也可为其他兽药残留检测试纸条的研制提供借鉴。……   
[关键词]:磺胺二甲嘧啶;胶体金试纸条;单抗;猪尿;残留检测
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业大学2005年