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筛选阴道正常细菌治疗奶牛慢性子宫内膜炎的研究

冯忠贵

  本研究共分六个部分:1、阴道内正常菌群的分离和鉴定2、慢性子宫内膜炎细菌性病原的分离和鉴定3、体外拮抗试验4、免疫原性的检测5、安全性检测6、病理模型的建立和治疗试验。(一)从经产健康奶牛的阴道采集阴道壁粘液样品,实验室内分离纯化菌群,然后经一系列形态学和生化鉴定,主要为表皮葡萄球菌、柠檬酸肠杆菌、嗜酸乳杆菌、大肠埃希氏菌、肠膜明串珠菌、多粘芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、干燥奈瑟氏球菌、金黄色葡萄球菌。(二)采集奶牛慢性子宫内膜炎内容物,用选择性培养基筛选到链球菌、大肠杆菌和葡萄球菌各一株,该三株分离菌致病性不强,是条件性致病菌。链球菌血平板呈a溶血;葡萄球菌血浆凝固酶阳性。(三)阴道分离细菌滤液和全菌液对金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌均有不同程度的拮抗作用。滤液拮抗作用强度依次是B_1、A_1、C_6、C_1、C_5、B_3、A_3、C_2、B_5、C_3、B_2、A_2。全菌液拮抗作用强弱依次是B_1、A_1、C_6、A_3、C_5、C_1、C_3、B_2、C_2、B_5、A_2、B_3;菌株B_1的抑菌圈与其他菌株比较,差异显著(P<0.05);参考抗生素抑菌能力的判定标准,三株子宫内膜炎病原菌对B_1、A_1的滤液和全菌液高度敏感,除B_2、C_2、A_2外,对其余分离菌株均中度敏感。(四)免疫原性检测试验表明,A_1、B_1、B_5、C_5四株菌能增强家兔免疫功能。阴道灌注免疫家兔后,血清中IgA、IgM含量呈上升趋势,IgG无明显变化。A_1菌株免疫家兔后血清中IgM含量与其他三株菌和对照组比较差异显著(P<0.05),而IgA较B_1菌株和对照组差异显著(P<0.05)。(五)对A_1、B_1、B_5、C_5进行安全性试验,证实四株分离菌是安全的。亚急性毒性试验结果表明,分别用不同浓度的菌液首次口服10只小白鼠及以后连续饮用30天,均对其无不良影响,繁育正常,剖检也无特殊病变。按毒理学在食品安全方面的评价标准该四株分离菌对小白鼠可评定为实际无毒级LD_(50)=501~5000mg/kg。(六)通过建立家兔阴道炎病理模型替代子宫内膜炎,嗜酸乳杆菌A_1以每次2ml的剂量经三次灌注冲洗用药治疗家兔阴道炎,治愈率分别为70%和87.5%。……   
[关键词]:阴道正常细菌;奶牛慢性子宫内膜炎;治疗
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:四川农业大学2004年