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三氯乙烯对体外培养皮肤角质形成细胞的损伤作用及维生素E的保护作用

丁锐

  目的 探讨有机溶剂三氯乙烯对体外培养的人皮肽角质形成细胞的毒性作用。方法 将来自3或3个以上不同个体的正常皮肤角质形成细胞混合培养后,于对数增长期进行染毒,利用中性红吸附实验,求出三氯乙烯的IC_(50),并以其为依据,选取不同的染毒剂量作用于体外培养的人皮肤角质形成细胞。使用LDH释放检测试剂盒检测细胞膜损伤状况;使用MDA、SOD、ROS试剂盒,测定三氯乙烯对体外培养的皮肤角质形成细胞氧化应激水平的影响:使用透射电子显微镜和流式细胞仪对三氯乙烯诱导的角质形成细胞凋亡进行定性和定量检测。对数据采用SAS 6.12进行统计分析。结果 本研究发现:①三氯乙烯对皮肤角质形成细胞毒作用的IC_(50)为4.52524mmol/L,95%可信限为(3.92210,5.12838);同时作为阳性对照的SLS对皮肤角质形成细胞毒作用的IC_(50)为0.27727 mmol/L,95%可信限为(0.19300,0.36154),处于相关文献报道的质量控制范围之内。②LDH释放检测结果显示三氯乙烯可以引起体外培养的皮肤角质形成细胞膜损伤,接触三氯乙烯时间越长、浓度越高,细胞膜损伤越严重。③三氯乙烯可以引起体外培养的人皮肤角质形成细胞氧化应激水平上升,接触三氯乙烯浓度越高,MDA水平越高,SOD水平越低,ROS水平越高。④三氯乙烯暴露可以诱导培养的皮肤角质形成细胞凋亡水平上升。结论 本研究发现三氯乙烯可以引起体外培养的人皮肤角质形成细胞损伤,并提示细胞膜损伤、氧化应激损伤和诱导细胞凋亡可能在其中发挥重要作用。……   
[关键词]:三氯乙烯;角质形成细胞;氧化应激;凋亡
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:安徽医科大学2004年