手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

优化安祖花规模化离体培养技术的研究

蔡能

  安祖花是我国近些年引进的一种名贵花卉植物,其花型奇特、花期持久、色彩丰富,深受人们青睐。但以传统的分株方法繁殖安祖花不仅繁殖速度慢、繁殖率极低,而且还受到季节的限制,这些因素极大地限制了安祖花的发展。为了解决这些问题,前人尝试了采用植物离体培养技术来快速繁殖安祖花,遗憾的是目前国内已报道的安祖花组培技术还未能达到工厂化培养的要求,特别是炼苗和移栽技术未能过关,另外,组培苗的病害也较为严重。本研究通过对离体培养中基本培养基、激素、糖类、pH值、光照、附加物、外植体等因素的探索,优化了安祖花快速繁殖体系,提高了愈伤诱导率和不定芽分化率;对安祖花进行移栽前药剂浸泡和炼苗处理,提高了移栽成活率,探讨了栽培过程中基质、光照等因素的影响,提高了种苗的生长速度和质量;对安祖花栽培中出现的细菌性枯萎病的病原菌进行了初步鉴定,运用链霉素抑制了病害的发生。其研究结果如下:1 安祖花大规模离体培养快速繁殖技术的优化在安祖花的愈伤组织诱导过程中发现,将BA与2.4-D配合使用比单独使用BA或2.4-D效果要好,诱导率分别提高8%和30%左右。适当降低基本培养基中N元素的浓度可以提高愈伤诱导率,当NH_4NO_3与KNO_3降到250mg/L时,诱导率达到100%,比前人的研究提高15%左右。使用不同糖类,诱导率不同,使用30g/L蔗糖或葡萄糖诱导率均可达到100%,比使用麦芽糖高13%;而在愈伤质量上,用葡萄糖诱导的愈伤组织较大,质量较好。以无菌苗叶片、叶柄为外植体,不同品种诱导率均可达97%以上;而盆栽苗则以全展叶的叶柄和成熟叶的叶片为外植体最好。愈伤组织诱导培养基以改良MS+BA0.2(0.5,1.0)+2.4-D0.1+30g/L葡萄糖较好。在愈伤组织分化不定芽时,使用较高浓度的BA与NAA,分化率可达到91.7%,而通过使用葡萄糖作为碳源,可使分化率提高到96.1%。分化培养基以改良MS+BA2.5+NAA0.5+30g/L葡萄糖较好,分化率高,分化芽较多。以腋芽增殖途径繁殖试管苗,培养基以改良MS+B ALO王NAA 0.1较好,增殖倍数达6.6,芽较长、基部愈伤少:在安祖花试管苗继代增殖过程中,基本培养基对继代产生影响,在试管苗鲜重的增长率上,改良MS与MS之间具有极显著差异。椰乳对生长具有促进作用,与不含椰乳的培养基之间差异显著。强光有利于试管苗的生长,光照强度为5500L况与2500Lx对试管苗鲜重增加率具有极显著差异。较适合的继代培养基为改良MS+BA(KT)2.。+NAAO.05+葡萄糖3。叭+椰汁100叭。在此继代培养基上,试管苗还能长出3一5条粗壮的根,可以不经生根直接进行移栽,简化了培养程序.2提高安祖花试管苗移栽成活率及生长速度的研究在试管苗移栽前的处理中,多菌灵溶液浸泡处理比KNln04溶液处理效果要好,其中,多菌灵以0.2%处理20min较好,成活率达91 .1%,比KMno4溶液处理的要高12%。揭膜炼苗对试管苗适应外界环境具有好处,揭膜5天成活率达到86%,揭膜7天以上,成活率达98%。移栽时带3条或3条以上的根对移栽苗生长时的株高、叶片数、根数均具有促进作用。从株高、叶片数、根数方面综合考虑,移栽基质以椰子壳:泥炭土:珍珠岩为2:0.5:0.5为好。在株高、叶片数、叶面积、根数上,普通日光灯和植物生长灯之间没有显著差异。护3新发现的安祖花细菌性枯萎病致病菌的初步鉴定与防治从安祖花枯萎病病叶上分离和纯化,得到一株细菌,通过回接安祖花,发现此细菌为安祖花细菌性枯萎病的致病菌。此细菌为革兰氏阴性菌,通过BiologMicrostatinn细菌自动鉴定系统将此菌株鉴定为恶臭假单胞菌生物变种A(Pseudomonas put才da biovarA)。此菌对安祖花的危害未见有报道,因此,此菌为一种新发现的安祖花细菌性枯萎病的致病菌。链霉素对此细菌的抑制作用比氯霉素要好,80mglL的链霉素即可完全抑制此细菌。通过用农用链霉素(1000万单位,149)配制成的0.15%的溶液进行试管苗移栽前的浸泡处理,最终成活率可以达到94.6%;对移栽苗进行灌根和叶面喷施,对病害的抑制具有较好的效果。……   
[关键词]:安祖花;离体培养;试管苗;移栽;细菌性枯萎病
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:湖南农业大学2004年