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红螯螯虾胚胎营养代谢的研究

李荷迪

  本文对红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)胚胎发育过程中的主要生化物质(水分、碳水化合物、脂类、脂肪酸、蛋白质、氨基酸)进行了测定,特别是对胚胎发育过程中主要的营养物质——卵黄磷蛋白的结构和含量变化做了细致的研究,同时讨论了这些物质的变化与红螯螯虾胚胎发育形态发生的相关性。一、水分、碳水化合物代谢在红螯螯虾整个胚胎发育过程中,含水量呈上升的趋势,第Ⅰ期含水量仅为53.15±1.35%,发育到第Ⅵ期含水量高达81.75±1.79%。其中第Ⅰ期至第Ⅱ期有一个显著的升高过程,后续发育各期增幅有所减缓。与此同时,碳水化合物的含量呈现两头少,中间无显著变化的现象。从Ⅰ期到Ⅱ期增加了干重的3.71%;而从Ⅴ期到Ⅵ期则由干重的7.41%下降到了3.71%。整个发育过程碳水化合物总的含量下降。二、脂类、脂肪酸代谢采用生化方法对红螯螯虾胚胎发育过程中脂类及脂肪酸的组成进行了测定和分析,结果表明:胚胎中的总脂含量呈下降趋势,其中极性脂的含量显著下降,而中性脂的含量变化不大。中性脂和极性脂的主要脂肪酸均为油酸(C18∶1ω9)、棕榈酸(C16∶0)、亚麻酸(C18∶3ω3)和硬脂酸(C18∶0)。各脂肪酸含量随胚胎发育进程总体上也呈下降趋势。三、蛋白质代谢在红螯螯虾的整个胚胎发育过程中,蛋白质含量总体上呈下降的趋势。由第Ⅰ期占样品干重的65.32±2.13%,下降到第Ⅵ期时的40.28±0.87%。同时各期氨基酸含量总体上呈现“低—高—低”的变化趋势。共检测到18种氨基酸,其中必需氨基酸(EAA)9种,非必需氨基酸(NEAA)8种。大部分必需氨基酸(除Met外)的含量亦呈现“低—高—低”的变化趋势。中文摘要红鳌鳌虾胚胎营养代谢的研究对卵黄磷蛋白的研究结果表明,随着发育期的推进,胚胎内卵黄磷蛋白含量总体上呈下降趋势,其中在第n期(3.19%)略有下降,至第V期(4 .67%)达最高,之后不断下降到第X期时含量只有第I期的1/4。可见,卵黄磷蛋白含量的变化与胚胎发育密切相关。红鳌鳌虾胚胎中,胃蛋白酶的比活力在前三期和第vI期均很低,第W期突然出现快速升高,达到最高值22.25士1 .89U/mg prot.;而胰蛋白酶的比活力在第I期至m期均很低,随后逐渐升高,至第V期达到最高,为16.69士1 .23U/mg prot.,但在第VI期略有下降。四、卵黄磷蛋白的生化特性采用凝胶层析、聚丙烯酸胺凝胶电泳及SDS一聚丙烯酞胺凝胶电泳法对红鳌鳌虾(Cherax quadricarinatus)卵巢中的卵黄磷蛋白进行了分离、纯化和鉴定。结果显示该虾的卵黄磷蛋白是一个分子量为369kDa的多聚体,由分子量分别为85.4、80.6、76.6、73.7kDa的四个亚基组成。染色分析表明该虾的卵黄磷蛋白为糖一磷一类胡萝卜素结合的复合蛋白。探讨胚胎发育过程中卵黄磷蛋白变化的规律,对于深入研究鳌虾的生殖营养至关重要。Westem Blotting结果显示:在自然状态下,卵黄磷蛋白的分子量并没有发生变化,只是含量随发育进程不断减少。发育初期,胚胎中含有较多分子量比卵黄磷蛋白大的蛋白,该部分蛋白先被消耗。但是,各期胚胎的匀浆经SDS解聚后发现,亚基结构变化较大,其中分子量较大和较小的亚基先被降解,组成卵黄磷蛋白的亚基也从发育初期的四个被不断的降解、消耗。在采用纯化的卵黄磷蛋白免疫兔子而获得其抗体的基础上,运用酶联免疫吸附检测法(enZyme一linked ilnlnunosorbent assay,ELISA)分析测定了发育过程中胚胎内卵黄磷蛋白的含量。……   
[关键词]:红螯螯虾;胚胎发育;生化成分;卵黄磷蛋白
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华东师范大学2004年