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地衣芽孢杆菌TS-01胞外多糖生产和功能的研究

彭爱铭

  地衣芽孢杆菌是一种益生菌,可用于人和动物肠胃紊乱的治疗和预防,但其作用机理并不清晰。本论文主要从其发酵液中的多糖着手,研究地衣芽孢杆菌胞外多糖发酵条件、多糖中杂蛋白的去除、多糖的功能,初步探讨其作用机制。实验发现,在本试验设计中,当发酵培养基中玉米粉4%、豆饼粉2%、玉米浆0.3%、CaCl_20.05%,K_2HPO_4 0.2%,初始pH为7,种子液菌龄为16小时,接种量为5%时,发酵液中活菌数和多糖产量都达到最高水平。另外,通过适当控制摇床转速、装液量等以维持适当的溶氧水平的因素,也会影响多糖产量。多糖产量还跟地衣芽孢杆菌本身所分泌的α-淀粉酶、蛋白酶有一定关系。当发酵液中乙醇浓度为50%、70%时,分别得到两种水溶性很好的多糖。用Sevag法去除多糖中杂蛋白时,样品与氯仿-正丁醇体积比为4:1,时间为30分钟比较适宜,既能提高多糖得率,又能尽量除去蛋白质。如用酶法脱除蛋白,宜用胰蛋白酶,用量为2.0U/mg,时间为4小时。相比之下,酶法稍好于Sevag法,但酶法操作较复杂,时间稍长。当DPPH溶液浓度为5×10~(-5)mol/L时,两种多糖溶液对DPPH的IC_(50)(抑制率为50%时多糖的浓度)均为3.2×10~(-4)g/mL,表明所提两种多糖有较强的清除自由基的效果。发酵上清液中所添加多糖剂量为5mg/mL时,能显著增加发酵液中SOD酶活(P<0.01)。表明多糖具有较强的抗氧化能力。用MTT法进行了T、B淋转实验,结果表明两种多糖在一定浓度时,能增强T、B淋巴细胞转化作用,间接表明两种多糖能提高机体的免疫能力。对致病菌的作用研究表明,两种多糖本身不具备杀菌能力,而是致病菌对多糖的利用率低才导致自身繁殖速度降低。……   
[关键词]:地衣芽孢杆菌;多糖;生产;功能
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业大学2004年