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黄芪多糖影响断奶仔猪免疫功能及其作用机理的研究

毛晓峰

  本文研究了黄芪多糖的制备、结构分析以及对断奶仔猪生长性能和免疫机制的影响。(1)研究了黄芪多糖的提取,用气相色谱法研究了单糖的组成。凝胶层析法纯化多糖并测定分子量。结果显示:黄芪多糖主要是由两种多糖组成的,其中之一的分子量59400,同时气相色谱法检测显示黄芪多糖主要是由葡萄糖、甘露糖、果糖、岩藻糖和阿拉伯糖所组成,摩尔比25.79:0.8:0.63:5.52:1。(2)研究了黄芪多糖在三种浓度下(0.1%,0.5%和1%)对金色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌等四种细菌的体外抗菌实验。结果发现,在低浓度的0.1%情况下,黄芪多糖对上述的四种细菌无抗菌作用,在0.5%浓度下,对大肠杆菌具有抗菌作用,而在1%的浓度下,黄芪多糖则对大肠杆菌、沙门氏菌以及金色葡萄球菌具有抗菌作用。(3)研究了黄芪多糖对脂多糖(LPS)免疫应激的断奶仔猪生产性能、炎性反应、内分泌激素以及免疫功能的影响,旨在探讨黄芪多糖是否具有缓解仔猪免疫应激的作用。选用108头体重为7.7±0.3 kg的28±3 d的大白×长白×皮特兰断奶仔猪,2×3因子设计:①黄茛多糖浓度(0,500,1000mg/kg);②免疫应激(注射LPS或生理盐水),试验期28 d。在第7和21 d,每日粮组中一半的猪注射200μg/kg BW的LPS,另一半注射生理盐水作对照。注射LPS后3 h,采血测定血浆IL-1β、PGE_2、皮质醇、GH和IGF-Ⅰ的含量。结果显示,LPS刺激显著地降低了断奶仔猪的日增重(ADG)(P<0.05)和日采食量(ADFI)(P<0.05)。黄芪多糖缓减了断奶仔猪生产性能下降。同时黄芪多糖减缓了LPS刺激的猪血浆IL-1β(P<0.05)、PGE_2(P<0.001)和皮质醇含量(P<0.05)的降低,提高了血浆IGF-Ⅰ含量(P<0.10)。在上述实验过程中,同时在注射LPS后第2 d前腔静脉采血测定外周血淋巴细胞转化率和白细胞介素2(IL-2)的活性。LPS刺激提高了外周血淋巴细胞转化率(P<0.10)和IL-2活性(P<0.10)。黄芪多糖增强了LPS刺激后的外周血淋巴细胞转化率(P<0.05)和IL-2的活性(P<0.05),并呈一次线性关系。上述结果表明,黄芪多糖可能通过降低炎性因子和应激激素的分泌以及提高免疫应激仔猪激活的细胞免疫反应而实现其抗免疫应激作用;(4)研究了黄芪多糖(0、40、80、160和320μg/mL)对断奶仔猪淋巴细胞内第二信使分子NO、Ca~(2+)、cAMP/cGMP和NO合成酶活性的影响。发现黄芪多糖能使仔猪外周血淋巴细胞NO产生显著增加,并呈二次剂量依赖关系(P<0.05),同时对iNOS活性也具有相似的作用;作用20min,黄芪多糖处理组显著地改变了淋巴细胞内cAMP和cGMP的浓度,并具有二次的剂量依赖关系(P<0.01,P<0.01),而作用60 min,多糖处理组对cAMP和cGMP浓度的影响都具有二次曲线关系(P<0.01,P<0.01),但处理间的差异出现了变化。因此,多糖对cAMP和cGMP浓度的影响具有时间和剂量依赖性;不同浓度(40、80和160 μg/mL)的黄芪多糖加入淋巴细胞悬液中时,细胞内[Ca~(2+)]_i都出现瞬间上升,其上升幅度有明显的剂量依赖关系,随后以相对低的速度下降,最后回到基础水平。上述结果显示,黄芪多糖能显著影响淋巴细胞信号传导,其免疫调节是通过改变细胞内信号分子浓度而实现的。……   
[关键词]:黄芪多糖;气相色谱;抑菌;仔猪;免疫应激;信号传导
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业大学2004年