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益气平悬饮对肺癌性胸水局部免疫功能影响及临床疗效之研究

黄立中

  肺癌性胸水目前尚无理想的治疗方法。中医药对本病有着独特的理论认识和治疗方法。本研究目的:进一步验证益气平悬饮的临床疗效并探讨其作用机理;研究内容和方法:(1)抗肿瘤作用。将Lewis肺癌和EAC瘤株分别移植于C57 BL/6J小鼠和昆明种小鼠,观察益气平悬饮体内抑瘤和延长荷EAC小鼠生存期的作用。(2)对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)杀伤自体肿瘤细胞(ATC)活性的影响。分离、培养患者胸水中的TIL、ATC,效靶比为40:1,加于含本药培养液中,共同孵育;分离、培养小鼠EAC腹水中TIL、ATC,效靶比10:1,加于不含本药培养液中,共同孵育,观察TIL对ATC杀伤活性。(3)采用ELISA方法,测定肺癌患者胸水中IL-2/IL-2R、IFN-γ、IL-4、IL-10水平;测定小鼠艾氏腹水癌中IL-2、IFN-γ和TGF-β1水平。(4)采用免疫组织化学方法,光镜下观察比较Lewis肺癌细胞凋亡个数。(5)采用RT-PCR方法检测Lewis肺癌组织细胞中IL-2、TGF-β1基因表达水平。(6)对照观察肺癌性胸水病人,口服益气平悬饮联合榄香烯胸腔内注射与单纯榄香烯胸腔内注射2组的临床疗效。结果:(1)益气平悬饮对Lewis肺癌的抑制率为28.38%~35.44%;对荷EAC小鼠生命延长率为32.81%~41.41%,与荷瘤对照组比,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)TIL在含药培养基中培养7天、14天、21天时,其杀伤活性分别为(46.62±0.36)%、(58.87±0.42)%、(59.10±1.09)%,与空白对照组(29.83±0.95)%、(48.82±0.88)%、(44.14±0.99)%比,差异有统计学意义(均P<0.05);口服益气平悬饮小鼠TIL对ATC杀伤活性,与模型对照组比,差异也有统计学意义(P<0.05)。(3)益气平悬饮+榄香烯组患者胸水中IFN-γ、IL-2明显高于单纯榄香烯组,而IL-2R、IL-4、IL-10水平与单纯榄香烯组稍低但差异无统计学意义(P>0.05)。口服益气平悬饮小鼠艾氏腹水癌中IFN-γ、IL-2明显高于模型对照组,TGF-β1明显低于模型对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(4)Lewis肺癌细胞凋亡数,益气平悬饮组亦明显高于荷瘤对照组(P<0.05)。(5)Lewis肺癌组织细胞中IL-2表达水平益气平悬饮组高于模型对照组,而TGF-β1表达水平则相反。(6)口服益气平悬饮联合榄香烯组与单纯榄香烯胸腔注射组比,胸水有效率(CR+PR)分别为95.5%、72.7%,主症疗效亦明显好于榄香烯对照组,组间差异有统计学意义,P<0.05。结论:(1)益气平悬饮体内能明显抑制Lewis肺癌的生长,显著延长荷EAC小鼠的生存时间。(2)本方体外能明显提高TIL对ATC的杀伤活性,患者胸水中TH1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平明显高于单纯榄香烯组,而IL-2R、IL-4、IL-10水平则相反,改善局部免疫微环境,有利于TH1/TH2向TH1方向漂移;能提高小鼠艾氏腹水癌中TIL杀伤活性和IFN-γ、IL-2水平,降低TGF-β1水平,进一步佐证益气平悬饮具有提高肿瘤局部免疫功能的作用。(3)本方能明显诱导Lewis肺癌细胞的凋亡。并提高IL-2、降低TGF-β1在Lewis肺癌组织细胞中的表达水平。(4)本方对肺癌性胸水有明显疗效,并能显著缓解癌性胸水引起的临床症状,与榄香烯胸腔注射治疗有协同作用。……   
[关键词]:益气平悬饮;肺癌;癌性胸水;肿瘤浸润淋巴细胞;白细胞介素-2;干扰素-γ;转化生长因子-β1
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:湖南中医学院2003年