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大豆黄酮对绍鸭产蛋性能的影响及其作用的受体机制

周玉传

  本研究以产蛋后期绍鸭为研究对象,在基础日粮中添加大豆黄酮来观察其对产蛋性能的影响,并从体内和体外两方面在整体、组织、细胞和分子水平上探讨大豆黄酮作用的受体机制。1 大豆黄酮对绍鸭产蛋性能、血清有关激素水平和组织基因表达的影响为了探讨大豆黄酮对产蛋后期绍鸭生产性能的影响及其调节机制,本试验随机选取320只415日龄绍鸭,均等分成大豆黄酮组和对照组。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加5mg/kg大豆黄酮,每日记录产蛋个数、平均蛋重和耗料量,并以产蛋率和平均蛋重的乘积作为日产蛋量,试验持续9周,试验开始和结束各称一次体重。每组随机采集90枚蛋,分离蛋白和蛋黄,并称重。试验结束时每组选取20只断头采血,离心得血清,取下卵巢和产道称重,并记录大卵泡数量;采集下丘脑、垂体、排卵前大卵泡(F_1、F_3、F_5)及大白卵泡(LWF)膜层和颗粒层。采用放射免疫分析法测定血清中激素水平,相对定量RT-PCR方法检测组织中基因表达的相对丰度。1.1 大豆黄酮对产蛋性能的影响与对照组相比,试验组产蛋率提高了7.70%(P<0.01),平均蛋重也有增加的趋势(P=0.058),而蛋中的蛋白重量明显提高(P<0.01),蛋黄重量显著降低(P<0.05)。日产蛋量提高了11.05%(P<0.01),料蛋比下降了6.44%(P<0.01)。大豆黄酮组的初始体重为1839.86±16.35g,末体重为1798.16±26.73g;而对照组初始体重为1854.65±23.89g,末体重为1698.45±31.45g,试验组的体重下降幅度显著小于对照组(P<0.01)。大豆黄酮组的产道重提高了14.99%(P<0.05),但是卵巢重和大卵泡数没有显著变化。结果表明,在产蛋后期绍鸭基础日粮中添加大豆黄酮能够显著提高产蛋性能和饲料利用效率。1.2 大豆黄酮对血清激素水平的影响大豆黄酮对绍鸭血清T_3水平没有显著影响,但是显著提高T_4水平(P<0.01)。与对照组相比较,大豆黄酮组绍鸭血清E_2水平提高了237.03%(P<0.01),而血清瘦蛋白水平没有显著变化,血浆总胆固醇水平提高了23.88%(P<0.05)。试验提示大豆黄酮提高绍鸭产蛋性能与血清中T_4、E_2和总胆固醇水平升高有关。周玉传大豆黄酮对绍鸭产蛋性能的影响及其作用的受体机制13大豆黄酮对组织中有关基因表达的影响13.1组织中ERa、ERp、GHR和IGF一IR的分布产蛋后期绍鸭下丘脑、垂体和F:、F3、FS及UWF卵泡的膜层和颗粒层中均有较高水平的ER a mRNA表达,且F,、F3、FS及LWF各级卵泡膜层的ER a mRNA的表达量没有显著差异,颗粒层则LWF卵泡ER a mRNA的表达量显著低于Fl、F3和F5卵泡;Fl、F3、FS相同发育阶段卵泡膜层和颗粒层ER a mRNA无显著差异,但UWF颖粒层ER a mRNA的表达量显著低于膜层。ER p mRNA在下丘脑中表达较高,垂体次之,卵泡膜层和颗粒层表达量较低.F:、F3、FS和U刃F卵泡颗粒层中GHR nlRNA的表达水平没有明显差异,膜层GHR mRNA的含量以UWF卵泡的表达量最高,在F:、F3、FS和LWF同级卵泡中颗粒层GHR mRNA水平均显著低于膜层;而相同发育阶段卵泡中IGF·IR mRNA水平颗粒层均显著高于膜层,F:、F3、FS和LWF不同发育阶段卵泡之间膜层及颗粒层IGF一IR mRNA的表达水平均无显著差异.可见,ERa和ERp在绍鸭体内分布差异很大,GHR和IGF一IR在膜层和颗粒层中具有相反的分布模式,提示ERa和ERp、GHR和IGF一IR在机体内可能发挥不同的生物学作用.13.2大豆黄酮对下丘脑、垂体、卵泡膜层和颗粒层组织中基因表达的影响下丘脑中,试验组G曲旧mRNA相对丰度提高了67 .11%(P<0 .05),而GHR、IGF一IR和ER p mRNA含量分别T降T 37.74%(P<0 .01)、19.51%(P<0.01)和33.53%(P<0 .05),ER a mRNA的表达量没有显著变化.垂体中,试验组ERa、GHR及IGF·IRmRNA的含量均无明显改变,但GH mRNA的相对丰度提高了21 .80%(P<0 .01).在卵泡中,大豆黄酮对F:、F3、FS和LWF各级卵泡的膜层和颗粒层GHR mRNA及颗粒层IGF一IR mRNA的表达量没有影响,但显著提高FI、F3、FS和UWF各级卵泡膜层中IGF一IR mRNA水平(P<0.01);另外,试验组F;和F3卵泡膜层ERamRNA的含量显著升高,FS卵泡的膜层ERa表达也有增加的趋势;而FS卵泡颗粒层ERa表达水平显著提高,FI、F3和LWF各级卵泡颗粒层中ER a mRNA增加,但没有统计上的显著性.试验结果表明,在中枢和外周,大豆黄酮能够影响生殖轴和生长轴激素或激素受体的基因表达来改善绍鸭的生产性能。2不同亚型雌激素受体(ER)真核表达体系的建立及其在大豆黄酮作用途径研究中的应用采用Rl’- PCR和PCR的方法从SD大鼠肝脏、前列腺、卵巢组织及pBluescriPtKS一ERp质拉中扩增ERa、ER pZ和ERp,然后克隆到表达载体中,以脂质体转染cHO一Kl细胞,并同时转染定童检测ER转录活性的报告载体以及内标载体,‘来观察中文摘要石奋亩日曰奋亩右二二盆盆昌吕吕奋言言盆二盆二二奋吕留二=二二二二二目留二吕吕;盆;;二留二二二二二二二留二大豆黄酮处理对不同亚型ER转录活性的影响,以探讨大豆黄酮作用的受体途径。2.1……   
[关键词]:大豆黄酮;绍鸭;生产性能;基因表达;雌激素受体;克隆;真核表达
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:南京农业大学2003年