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盾叶薯蓣四倍体诱导及快繁技术的研究

李运合

  盾叶薯蓣的薯蓣皂甙元含量是世界上最高的。近些年来薯蓣皂甙元含量逐年下降。多倍体植株普遍表现出高产、优质、药用成分增加等优点。本试验的目的是为了找到合适的诱导方法,以得到产量更高、而薯蓣皂甙元含量也高的四倍体植株。以带腋芽的茎段为外植体,选用不同培养基来建立四倍体盾叶薯蓣快繁体系,并对适宜的移栽基质,水、温、光照等管理条件进行了有益的探讨。选择刚露出绿色芽点的盾叶薯蓣愈伤块,用8种高浓度秋水仙素水溶液和4种低浓度秋水仙素水溶液的方法,诱导多倍体植株。运用流式细胞仪和染色体计数等方法对诱导植株进行综合鉴定,并比较了四倍体植株和二倍体植株的生理生化特点和形态解剖学特征。主要研究结果如下:1.建立了盾叶薯蓣的快繁体系。各个阶段的培养基:诱导和增殖的基本培养基为W培养基,即B_5的大量元素+MS的微量元素。诱导及增殖培养基:W+6-BA 2 mg·L~(-1)(单位下同)+IAA0.2;壮苗培养基:W+NAA2;生根培养基:1/2MS+IBA2+NAA0.04+0.04%活性炭。试管苗适宜的移栽条件为:生根培养基中培养3周,炼苗,移栽到珍珠岩+泥炭土(1:2)混合基质,覆盖塑料薄膜,喷施1/2MS营养液,一个月左右移栽到大田,成活率可达85.4%。2.经流式细胞仪检测和根尖染色体计数,获得的多倍体为四倍体和嵌合体。3.获得四倍体盾叶薯蓣的最佳处理条件是:24℃下将刚露出芽点的愈伤块浸泡到0.1%的秋水仙素溶液中24h,在60-70r/min的摇床中黑暗处理,然后转到普通培养基上继续培养。四倍体的诱导率可达35.2%。4.细胞学证据为染色体数目加倍。四倍体盾叶薯蓣的形态学变化是叶色加深,叶片增大;显微结构变化是气孔变大,气孔密度减小,保卫细胞内叶绿体数目增多;生理指标变化是叶绿素含量增加,过氧化物酶活性减弱。……   
[关键词]:盾叶薯蓣;秋水仙素;四倍体;快繁
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2003年