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纳米硒对Avian肉鸡的生物学效应及其分子机理的研究

胥保华

  纳米硒(Nano-Se)是以蛋白质为分散剂的单质硒纳米粒子。本课题以纳米硒为试验材料,用硒代蛋氨酸(Se-Met)和亚硒酸钠(Na_2SeO_3)为对照,在雏鸡肾细胞和Avian肉鸡上研究了纳米硒对细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性以及鸡体的抗氧化能力、免疫机能、激素含量、组织硒水平、肌肉品质和生长性能的影响,并探讨了纳米硒对肉鸡肝脏组织GPx和IDⅠ mRNA丰度的影响。以含5%胎牛血清的M199为基础细胞培养液,每种硒源设0.01,0.05,0.10,0.20,0.30μmol/L5个浓度梯度,每个浓度梯度设三个重复,并设一个空白浓度,分别测定培养24h、48h、72h、96h后的细胞内GPx活性。饲养试验中三种硒源均以0.10,0.20,0.30,0.40,0.50mg/kg硒添加水平添加到基础日粮中,配制成15种试验日粮。选择健康Avian商品代公母混合雏2160羽,按试验要求共分为16组(含一个基础日粮组),每组3个重复,每个重复45羽,饲养试验为期6周。饲养试验结束后,每组各选体重相近的肉鸡(公母各半)6羽,共96羽,屠宰,取相关血清和组织样品进行抗氧化指标、免疫学指标、肉质指标、组织硒水平、血清激素水平和肝脏组织GPx、IDⅠ活性以及肝脏组织GPx、IDⅠ mRNA丰度的测定。获得以下主要结果:1、细胞培养试验表明,在0.01~0.10μmol/L浓度范围内,相同硒浓度下三种硒源之间在细胞GPx的活性上无明显差异(p>0.05),GPx的活性随培养液中硒浓度的增加而提高,显示出良好的效应—剂量关系;亚硒酸钠在培养液中的硒浓度>0.10μmol/L、硒代蛋氨酸>0.20μmol/L时,对细胞GPx活性具有抑制作用,并随着硒浓度增加和培养时间的延长愈发强烈;而纳米硒在0.10~0.30μmol/L硒浓度范围内,细胞GPx活性始终保持在高峰平台,显示了其安全性较高,适宜添加剂量范围较宽。2、饲养试验显示,饲料中硒添加水平≤0.40mg/kg时,三种硒源对肉鸡生长性能的影响无明显差异(p>0.05);硒添加水平提高到0.50mg/kg时,纳米硒组肉鸡生长性能显著地高于硒代蛋氨酸组和亚硒酸钠组(p<0.05)。3、肉鸡抗氧化能力分析揭示,硒添加水平≤0.40mg/kg时,三种硒源同一添加水平上对肉鸡血清和组织中GPx活性和总抗氧化能力(T-AOC)的影响无显著性差异(p>0.05)。添加0.50mg/kg硒时,硒代蛋氨酸组和亚硒酸钠组的GPx活性和T-AOC与同硒源0.40mg/kg硒添加水平相比显著下降(p<0.05),机体中活性氧水平和丙二醛(MDA)含量显著升高(坏0.05);而纳米硒组无明显变化。4、肉鸡胸肌肌肉品质的分析可见,在添加0.50mg/kg硒时(高剂量),纳米硒与硒代蛋氨酸和亚硒酸钠相比,显著降低了肌肉滴水损失(尽0.05)、提高了肌肉红色色度(坏0.05)、增加了肌肉中肌红蛋白含量(尽0.05)。5、血清免疫指标测定表明,在硒添加水平为0.20,0.30,0.40,0.50 mg/kg时,纳米硒组血清IgG含量显著高于硒代蛋氨酸组和亚硒酸钠组(坏0.05),血清工gM含量显著高于亚硒酸钠组(坏0.05);血清工gA含量三种硒源间无显著差异(P>0.05)。6、在0.50 mg/kg硒添加水平时,纳米硒使血清胰岛素(Insulin)水平显著高于两个对照组(尽0.05)。7、三种硒源在血清T3、T4、TSH水平,肝脏组织IDI活性和组织硒含量等指标上无显著差异(P>o.05)。8、分子生物学的试验结果表明,0.50 mg/kg硒添加水平时,纳米硒组CGPx mRNA丰度比亚硒酸钠组高31.25%(尽0.05),比硒代蛋氨酸组高25.00%(尽0.05)。三种硒源对肉鸡肝脏组织ID 1 mRNA丰度的影响无显著差异(沪0.05)。本研究结果提示:(l)纳米硒作为硒源在抗氧化能力、提高肉鸡生长性能、体液免疫效能和改善肌肉品质等方面表现出更强的营养生物学作用;(2)纳米硒调控肉鸡肝脏组织CGPx mRNA稳定性的能力更强;(3)纳米硒的weinberg剂量一效应的最适剂量范围宽于硒代蛋氨酸和亚硒酸钠,显示出对动物的安全性更高,这对于饲料新硒源的开发利用具有实践意义。……   
[关键词]:纳米硒;Avian肉鸡;生物学效应;谷胱甘肽过氧化物酶;细胞培养
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:浙江大学2003年