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新颖的软性人工角膜的研制及生物学评价

李艳

  第一部分 PHEMA人工角膜的体外实验目的:观察PHEMA材料浸渍液对细胞的毒性,及角膜成纤维细胞在PHEMA材料中的生长,探讨PHEMA用作人工角膜材料的可能性。材料和方法:用含微孔PHEMA材料浸渍液的培养基培养角膜成纤维细胞,用台盼蓝染色法进行细胞计数测定细胞活力,用分光光度计测定细胞的相对增殖度。将传代的角膜成纤维细胞接种于两种孔径的PHEMA材料中,观察细胞的生长情况。结果:成纤维细胞在含材料浸渍液的培养基中生长良好,24h、48h、72h无孔和微孔PHEMA组的细胞活力与对照组无显著性差异(p>0.05)。2d、4d、7d无孔和微孔PHEMA组的细胞相对增殖度均大于85%,细胞毒性为一级。50-70μm直径微孔材料空隙中的细胞密度高于80-100μm微孔材料。结论:微孔PHEMA材料对角膜成纤维细胞生长影响小,是生物相容性较好的材料。第二部分 PHEHA人工角膜的体内实验目的:观察PHEMA材料在兔皮下埋藏所引起的组织反应,观察PHEMA材料植入到兔角膜板层后角膜的组织学及超微结构的改变,及植入物内各型胶AbstmCt原和纤连蛋白的表达。观察PHEMA人工角膜植入兔眼后所引起的组织反应。材料和方法:将无孔和微孔PHEMA材料及3号医用缝线植入到兔皮下,于术后1周、2周、4周、及8周处死动物,取埋藏处组织进行HE染色;将50一70协m和80一100协m直径的PHEMA材料植入到兔眼角膜板层,于术后半月、l月、2月、3月、4月处死动物行HE染色,电镜观察,胶原I一Vl型及纤连蛋白的免疫组织化学染色;兔眼植入PHEMA材料的人工角膜,术后4月和5月处死动物行HE染色,并观察术后并发症的发生。结果:埋藏于兔皮下的无孔及微孔PHEMA材料周围组织炎症反应较轻。微孔的PHEMA人工角膜支架允许角膜成纤维细胞的长入,角膜成纤维细胞可在PHEMA材料中合成胶原I一Vl型及纤连蛋白。孔径为50一70 pm的PHEMA材料中长入的角膜成纤维细胞量及合成的各型胶原,纤连蛋白比孔径为80一100pm的PHEMA材料多。PHEMA材料人工角膜植入兔眼后并发症的发生少。结论:无孔和微孔的PHEMA材料对组织的刺激险小,有很好的组织相容性。角膜成纤维细胞可以长入微孔的PHEMA材料,并在其中合成各型胶原。孔径为50一70pm的PHEMA材料比80一100pm的材料更利于角膜成纤维细胞的生长。PHEMA材料的人工角膜是比较理想的人工角膜。……   
[关键词]:人工角膜;PHEMA;生物相容性;细胞毒性;角膜成纤维细胞;孔径;胶原;纤连蛋白;并发症
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:青岛大学2002年