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抗链霉素单克隆抗体制备与ELISA方法的建立

王谦

  为探索一种能快速而有效监测食品中链霉素残留的方法,本研究利用合成的链霉素-肟与牛血清白蛋白偶联,制备成全抗原后免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立了一株能稳定分泌抗链霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3B_1-G_(12)-C_(12),并对此细胞进行了鉴定和抗体应用的初步研究。3B_1-G_(12)-C_(12)抗体的鉴定结果为:抗体属IgG_1亚类;与双氢链霉素的交叉反应率为120%,与庆大霉素、卡那霉素、新霉素的交叉反应均小于0.1%。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为1∶10~4以上,腹水抗体效价为1∶10~8以上。秋水仙素阻抑法计算该细胞染色体数平均为96,体外传代培养和冻存复苏后分泌抗体稳定。以3B_1-G_(12)-C_(12)单抗为基础,建立了间接竞争性抑制ELISA方法,该方法对硫酸链霉素的最低检出量为2ng/ml,尿及牛奶添加回收率为90%~105%。与其它方法综合对照最低检出量、效率、精确度、费用等参数可得出用ELISA检测链霉素残留是一种高效、快捷、可靠的方法,可大力推广应用。……   
[关键词]:链霉素;单克隆抗体;ELISA;残留检测
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业大学2003年