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荧光光度法研究药物与生物大分子的相互作用及其应用

高明霞

  蛋白质组(Proteome)一词,源于蛋白质(protein)与基因组(genome)两个词的杂合,意指“一种基因组所表达全部蛋白质”。蛋白质组的研究不仅为生命活动规律提供物质基础,也能为众多疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。因此,研究药物与生物大分子的相互作用对寻找药物的靶分子,新型药物设计,抗癌药物的药理和毒理的研究等方面都有重要的参考价值。目前的环境污染尤其是食品污染日益威胁人类健康,俗话说“民以食为天”,因此食品安全检测与打假是规范市场经济秩序的一项重要内容,是保证当前经济正常运行和完善社会主义市场经济体制的重要举措,也是确保人民群众身体健康和生命安全的迫切要求,因而,急需一整套简便可行且灵敏度高的检测方法来防范有害食品进入市场。本文主要以以上两个方向为目标,以分子光谱(荧光、紫外-可见光谱)与离子色谱方法为研究手段,分别对药物与生物大分子的相互作用及食品中有害物质的检测进行了研究,共分为三章。第一章,利用荧光光谱法研究了药物与蛋白质的相互作用。以人血清白蛋白、牛血清白蛋白为研究主体,以抗癌药物盐酸表阿霉素、柔红霉素,及抗高血压药物特拉唑嗪为研究客体,利用荧光猝灭理论和非辐射能量转移理论,研究了药物对白蛋白的猝灭机制,求出了两者的结合常数,并求出了金属离子存在时的结合常数,又根据热力学函数,讨论了二者的相互作用类型,针对测定药物特拉唑嗪时蛋白的背景干扰大的现象,利用同步荧光技术的谱带窄化,光谱的重叠现象少等特点,成功地排除了干扰,实现了定量测定,提高了分离度,降低了检测限。第二章,环丙沙星与稀土金属离子Tb~(3+)存在分子能量转移,发射出Tb~(3+)的特征荧光,因此可以将其配合物作为荧光探针检测DNA,另外,DNA独特的疏水性微环境显著地敏化了环丙沙星与Tb~(3+)配合物的荧光。本章利用荧光光度法和紫外吸收分光光度法研究了核酸对环丙沙星-Tb~(3+)体系的荧光增强效应及其影响因素,探讨了其作用机理,提出了环丙沙星-Tb~(3+)配合物与核酸的作用模型,并建立了DNA的选择性测定方法,并将其运用于合成样与血清中DNA含量的测定。第三章,甲醛次硫酸氢钠(俗称“吊白块”)是一种禁止加入食品中的工业用漂白剂,山东师范大学硕士研究生毕业论文本章以此为研究对象,采用离子色谱方法,利用化学再生的抑制柱降低背景电导,阴离子色谱柱进行分离,电导检测器对其进行分析检测,成功的探索了样品的前处理,提出恒温搅拌氧化法,针对淀粉含量多的样品难以过滤的问题,提出了蒸馏氧化法,另外,研究了最佳的色谱条件,及不同情况下的定性分析与定量检测依据,并将其成功地运用子实际样品的测定。……   
[关键词]:荧关光度法;荧光猝灭理论;非辐射能量转移理论;荧光探针;离子色谱法
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:山东师范大学2003年