手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

IBDV快速诊断试纸在该病病原和抗体快速检测中的应用及鼠抗兔-IgG单克隆抗体的研究

罗俊

  为探讨IBDV快速诊断试纸用于该病病原和抗体检测的可行性,建立了双夹心ELISA,并用快速诊断试纸和AGPT对疫苗效价与免疫效力的关系、疫苗病毒在雏鸡体内的存在时间及分布规律、母源抗体的消长规律及对疫苗免疫效果的影响、卵黄抗体效价检测等进行了研究。结果表明,IBDV快速诊断试纸的敏感性高于双夹心ELISA和AGPT。9种疫苗效价由高到低依次为B87,D78,新Ⅰ号,V877,法倍灵,NF8,百倍灵,MB,228E。5种被测疫苗毒在体内的存在时间依次为:MB、228E9天,NF8 8天,V877 7天,NEW Ⅰ 4天。疫苗毒体内存在时间与其抗原效价高低呈负相关,该结果对评价和选择疫苗具有指导意义。组织中疫苗毒含量从高到低依次为:法氏囊,脾脏,肝脏,盲肠扁桃体,胸腺。5种疫苗免疫鸡的肾脏均未测到疫苗毒。快速诊断试纸和AGPT监测表明,0日龄测不到母源抗体,3日龄达峰值,14日龄消失。试纸效价≥1:10(AGPT阳性率46.1%以上)的母源抗体中和疫苗毒的能力较强,并使灭活苗免疫后抗体空白期推后1周;试纸效价1:5(AGPT阳性率39.4%)的母源抗体对疫苗仍有一定干扰,但比前者小得多。攻毒结果表明,B87株疫苗对H4超强毒和BC6/85标准毒均有较好保护力,D78进口苗对BC6/85的保护力强于H4,灭活苗仅对H4具有较强保护力,进口苗W2512对两种毒株的免疫保护都很差。因此在进行疫苗免疫前须作母源抗体监测,以试纸效价<1:5时为最佳首免时间,并选择合适的疫苗毒株。用快速诊断试纸和AGPT检测卵黄抗体,两者测得效价之间具有极显著的直线回归关系(r=0.898)。试验证实,IBDV快速诊断试纸不仅可用于检测强毒和疫苗毒,而且一可用于母源抗体的监测、免疫抗体和卵黄抗体的检测,为该病的临床诊断和疫苗免疫提供指导。以兔IgG免疫Balb/C小鼠,经细胞融合,建立了一株稳定分泌抗兔IgG单抗的杂交瘤细胞株,命名为ZE。Al。。经测定,ZE杆l。细胞培养上清和腹水的 AGPT和 ELISA效价分别为 1:8、1:320和 1:16、1:32000,该单抗与兔IgM,人、猪、鸡IgG/I gM均无交叉反应。。鼠抗兔《 单抗细胞株的建立,不仅为本室的单克隆抗体库补充了新的单抗细胞株,还可满足其他单位的科研和生产需要。ZEsA;。株单抗的其它生物学特性仍有待进一步研究。……   
[关键词]:IBDV;快速诊断试纸;双夹心ELISA;母源抗体;细胞融合;鼠抗兔-IgG单克隆抗体
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河南农业大学2003年