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姬松茸富硒培养条件及其富硒特性生理生化基础的研究

杨淑云

  近年来,开发安全高效、成本低廉的补硒食品和药品,已成为生物学、医药学、食品科学等领域的研究热点。食用菌富硒液体培养的研究应用,为开发富硒保健品提供了一条安全、有效的途径。食用菌富硒液体培养就是指在培养液中添加无机硒,利用菌丝进行硒的富集和生物转化,将不利于人体吸收利用的无机硒转化为吸收利用率高、安全无毒的生物源有机硒。它不仅具有生产周期短、成本低和转化率高等优点,而且改善了食用菌菌丝自身的营养成分,使蛋白质、氨基酸、可溶性糖等营养物质的含量和质量均得到不同程度的提高。姬松茸是一种具有极大商品潜力的珍稀食药用菌,在提高免疫功能、抗癌、抗凝血、降血脂、安神等方面具有独特疗效。姬松茸子实体的硒含量极低,以其为载体进行富硒液体培养,培养富硒菌丝,进行富硒保健品的生产,可以结合姬松茸与硒二者之长,提高其药用价值和经济价值,将具有极大的市场前景。目前,有关姬松茸富硒方面的研究甚少,富硒姬松茸液体培养体系的建立和富硒作用机理的系统研究在国内外尚属空白。本试验通过对姬松茸富硒培养条件的筛选,研究了硒源种类及浓度、培养基成分、摇瓶培养条件等对富硒转化能力的影响;同时,对姬松茸在固体平板培养和液体振荡培养条件下的耐硒能力和富硒作用进行了研究。试验还通过研究硒对姬松茸菌丝的物理性状、菌丝蛋白质和糖含量的影响,有机硒的含量和主要化学形态以及硒对七种胞外酶活性和两种同工酶电泳谱带的影响,对姬松茸富硒特性的生理生化基础进行了初步探讨。试验结果表明,用含硒1ug/mL的Na_2SeO_3驯化二级液体摇瓶菌种,以玉米粉3.0%、硫酸铵0.3%、葡萄糖1.0%、酵母膏0.1%、KH_2PO_40.2%、MgSO_4·7H_2O 0.1%、维生素B_10.01%为培养基配方,250mL三角瓶装液量80mL,添加含硒量为20ug/mL的Na_2SeO_3,接种量10%,初始pH 7,于25±1℃、80r/min的水浴恒温振荡器中培养8d是富硒姬松茸液体振荡培养的最佳条件。研究还发现,姬松茸具有较强的耐硒能力和富硒作用,适合作为生产富硒保健品的菌种。在液体培养中其菌丝富硒存在着一定的规律性,当硒浓度为1~20ug/mL时,菌丝富硒量(Y)与硒添加量(X)呈极显著正相关,回归方程式为:Y=3.0458X+0.0249r=0.9999。在不抑制姬松茸菌丝生长的情况下添加无机硒进行富硒培养,其菌丝含硒量不会超过人体正常的硒需要量,根据试验结果并结合有关数据,我们发现,每人每日进食加硒20ug/mL培养的姬松茸富硒菌丝1克就可满足人体日常生理的硒需要量,且不超过安全最高量。哈尔莲宫月信沐各件及其它记特代主℃如匕基认的研究姬松茸富硒特性生理生化基础的研究结果表明,添加适当浓度的硒对菌丝蛋白质和糖的合成以及对菌丝胞外蛋白酶、淀粉酶、过氧化物酶、装甲基纤维素酶(CMC酶)。半纤维素酶*C酶)、漆酶和愈创木酚酶的活性具有促进作用,且最适浓度除淀粉酶是10uglmL外,其它酶均是20u咖L。其中胞外淀粉酶活性和可溶性糖含量、蛋白酶活性与蛋白质含量以及蛋白质增量和蛋白硒富集量之间具有相关性。另外,对菌丝胞内过氧化物酶OER)同工酶和酯酶间T侗工酶酶谱的研究发现,硒同样具有增强菌丝胞内酶活性的作用。本试验推测姬松茸富硒作用机理为,添加适量的 Na。SeO。进行姬松茸富硒液体培养,无机硒进入菌丝后,经生物转化形成有机硒,并促进或参与体内酶的转化,增强了酶的活性,进而促进菌丝的新陈代谢活动,使菌丝生物量和蛋白质等营养物质的含量得到提高,而蛋白质又是菌丝中硒的主要结合物质,因而又促使更多的硒与蛋白质结合,这在很大程度上增强了菌丝吸收和转化硒的能力即富硒能力。综上所述,本试验对富硒姬松茸液体振荡培养条件及其耐硒和富硒能力进行了较为全面的研究,为富硒姬松茸液体培养体系的建立,富含有机硒的一种新型补硒剂和保健品的开发利用提供了技术基础,同时对姬松茸富硒特性的生理生化基础进行初步探讨,从代谢水平上初步认识和了解硒影响菌丝富硒生长的作用机理,为开发富硒食用菌保健品提供了试验依据,也为食用菌富硒机理的进一步研究奠定了一定的理论基础。……   
[关键词]:姬松茸;液体培养;富硒特性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:西南农业大学2003年