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嗜水气单胞菌单克隆抗体的制备及应用研究

陈红燕

  本研究选取福建地区患败血症欧鳗中分离的嗜水气单胞菌菌株YT-1,经溶血试验、PCR、毒力试验等分析测试,证实该菌能致死欧鳗和小鼠,并产生具有溶血活性、致死性的胞外毒素。利用杂交瘤单克隆抗体技术制备了YT-1和AH10501(标准株)两株嗜水气单胞菌的菌体单抗,筛选出11个能稳定分泌抗嗜水气单胞菌单克隆抗体的细胞株,分别命名为AF11、FA4、AG4、CA4、EE8、CF2、DC5、GH9、2F9、2H4、4G4。这些单抗类型分属IgM、IgG _2两个亚类,上述单抗均具有ELISA反应特性,腹水抗体效价在10~(-4)-10~(-6)之间,其中2F9还具有凝集反应特性。ELISA特异性分析结果表明4G4、2H4、FA4、GH9、CF2为嗜水气单胞菌血清型特异性单抗,4G4、2H4只识别同一血清型O:AH10501(本实验室命名)的嗜水气单胞菌分离株,而FA4、GH9、CF2却识别另外一种血清型O:YT-1(本实验室命名)的AH菌,上述几株单抗与其它的气单胞菌属,以及鳗弧菌、爱德华氏菌、克鲁氏耶尔森菌、沙门氏菌、大肠杆菌、荧光假单胞菌和腐败假单胞菌均不反应。4G4、2H4、FA4三株单抗免疫印迹结果表明它们所针对的抗原是菌体脂多糖(LPS)。进一步分析提示4G4、2H4与FA4识别的LPS分子量有差异。4G4、2H4、GH9还具有免疫荧光特性。菌体单抗研究结果表明4G4、2H4和GH9三株单抗可应用于嗜水气单胞菌的诊断和血清分型。……   
[关键词]:嗜水气单胞菌;毒力;单克隆抗体;ELISA;免疫印迹;免疫荧光
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:福建农林大学2002年