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毛细管亲和整体色谱柱的制备及应用

潘再法

  相对于常规高效液相色谱,毛细管高效液相色谱具有以下优点:样品需要量和流动相消耗量大大减少;流量大大降低,方便了与一些如质谱等浓度型检测器的联用。同时在毛细管液相色谱中采用整体柱的形式:可以避免复杂的装填过程和塞子的制作;并且此整体柱具有良好的通透性,本实验中可以在毛细管电泳仪具备的压力下实现快速分离。论文第二章分别以二元交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)和三元交联剂三甲氧基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRIM)为交联剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体制备了毛细管整体柱。接着对其表面进行化学修饰,分别制得了含有11个碳原子间隔臂以及不含间隔臂的,键合了蛋白A的毛细管亲和整体柱。并对所制备的整体柱进行了形貌和孔径分布的表征。第三章考察了基于二元交联剂(EDMA)的毛细管亲和整体柱在人免疫球蛋白G(HIgG)的分离分析中的性能和应用。比较了有无间隔臂固定相对非特异吸附性能的影响,发现不含间隔臂的毛细管亲和整体柱没有对BSA的非特异吸附;故用不含间隔臂的亲和整体柱来测定人血浆中人免疫球蛋白G(HIgG)。得到了HIgG的峰高与标准溶液的浓度间有很好的线性关系,其相关系数为0.9987;测定了人血浆中HIgG的含量。在快速分析实验中,一次运行可在0.7分钟内完成。第四章考察了基于三元交联剂(TRIM)的毛细管亲和整体柱的性能和应用。结果表明,在不含间隔臂的整体柱上同样没有检测到BSA的非特异吸附;考察了测定人血浆中HIgG的重现性;测定了HIgG的峰高与标准溶液的浓度间的标准浙江二业大学硕士学位论文Q(.曲线及人血浆中 HIgG的其含量。并且通过测定峰高与洗脱压力的关系,验证了用于快速分离分析的可行性。第五章比较了基于 EDMA和 TRIM的毛细管亲和整体柱的重现性和压力流速曲线,得出了基于三元交联剂(TRIM)的整体柱具有更高的机械强度的结论。.通过电子扫描电镜图和孔径分布图,以及对聚合机理的探讨,对两种整体柱的性能差异作出了一定的解释。……   
[关键词]:毛细管液相色谱;毛细管亲和整体柱;交联剂;蛋白A;HIgG
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:浙江工业大学2002年