手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

外固定支架及骨炎定对骨性关节炎的实验研究

曹燕明

  骨性关节炎是一种因各种不同原因导致的以关节软骨退变为主要病理特征的综合征,是骨科临床的多发病和常见病。目前公认的骨性关节炎的发病机制有负荷传导紊乱、自由基及细胞因子、血液循环障碍、关节软骨酶、自身免疫反应等原因。本试验用与人有近似力学环境的鸡作实验动物做骨性关节炎的造模,探讨用可活动的带关节的外固定支架固定关节两侧,通过撑开关节面,减少关节面的负重,改善关节的力学环境达到预防和治疗骨性关节炎的目的。陈基长教授研制的中药骨炎定能减轻骨性关节炎的临床症状,改善关节功能。它的成分是红花、牛膝、补骨脂、骨碎补、北芪,具有补肝肾,益气血的功效。为深入探讨其作用机理,本实验研究骨炎定对动物关节软骨病理形态和血清氧自由基的影响,以及测定骨炎定对内皮细胞的影响。实验一带关节的外固定支架及骨炎定对鸡膝关节病理形态的影响的观察目的:用鸡膝关节造成骨性关节炎的模型,观察带关节的外固定支架和中药骨炎定是如何影响鸡膝骨性关节炎的病理形态。方法:采用25只三月的雄性AA鸡做实验动物,分成5组,每组5只鸡。分成对照组,不做任何处理。造模组,骨性关节炎的造模方法是,于鸡的膝关节切断前后交叉韧带,切除半月板,直到确认膝关节抽屉试验阳性。中药组,即造模后给予中药骨炎定汤剂灌胃。带关节的外固定支架组,即造模后给予带关节的外固定支架撑开保护关节面。造模后在缝合伤口前,在关节的远近端,距关节面1-2cm垂直骨面由内到外,钻入直径1mm的克氏针4条,克氏针相距约1-2cm。将克氏针插入带关节的外固定支架的固定块中用镙钉固定。旋转镙母撑开关节面,同时活动关节,确认关节活动可。带关节的外固定支架加中药组,即给予带关节的外固定支架和中药骨炎定治疗。饲养12周后处死,取标本做病理形态学的观察。结果:造模组,于鸡膝关节形成明显骨关节炎病理特征,有关节软骨面不光滑、关节软骨缺损、骨赘生物形成、软骨软化,关节周围结缔组织增生,远侧关节面明显,并形成类似半月板结构保护远侧关节面。镜下见,软骨表面不平滑,出现多个裂隙,部分软骨剥脱,形成缺损区。表面出现多个空隙窝,软骨细胞消失,部分软骨细胞固缩,偏于一侧。深层出现软骨细胞簇积现象,软骨下骨板增厚。用鸡可造出骨性关节炎的模型。中药组软骨组织破坏程度,明显低于造模组。所有带关节的外固定支架组软骨组织破坏程度与造模组无明显区别。结论:带关节的外固定支架没有达到保护关节的目的,而中药骨炎定能达到保护关节软骨的目的。外固定支架及骨炎定对骨性关节炎的实验研究目的:探讨骨炎定防治骨性关节炎的机理,对骨炎定影响鸡实验性膝关节炎氧自由基的代谢进行研究。方法:选取鸡40只,随机分成正常组、模型组、骨炎定低剂量组、骨炎定高剂量组和芬必得组,每组8只,雌雄各半。骨炎定低剂量组、骨炎定高剂量组分别灌胃 58/kg、10g/kg药物,芬必得组灌胃 150wig药物,正常组和模型组灌胃同体积的蒸馏水,每天2次,早晚各1次。用超氧化物歧化酶试剂盒、丙H醛试剂盒分别测定各组血清SOD活性和MDA含量。结果:骨性关节炎时,鸡血清超氧化物歧化酶活性下降,与正常组比较有显著性差:异(凸P功.05人骨炎定低剂量组、高剂量组能提高骨性关节炎鸡血清超氧化物歧化酶活性,与模型组、正常组比较均有显著性差异(P<0刀1),芬必得组和正常组相当,两者无显著性差异(*功刀5人骨性关节炎时,鸡血清丙二醛含量上升,与正常组比较有显著性差异(’P<0刀1)。骨炎定低剂量组、高剂量组能降低骨性关节炎鸡血清丙二醛含量,与模型组比较有显著性差异O邓刀leq刀5人且正常组与芬必得疗效相当,两者无显著性差异(*刀>0刀5)。结论:骨炎定通过提高实验性膝关节炎鸡血清SOD活性,清除了体内过剩自由基,降低了血清MDA含量,防治了氧自由基对患病关节的损伤,从而起到了延缓关节软骨的退变,促进了软骨修复,达到了治疗骨性关节炎的目的。实验三 中药骨炎定对皮内细胞的增殖作用目的:用MTT法测定含中药骨炎定的兔血清对人脐静脉内皮细胞的增殖作用。方法:首先制备含药血清,给兔灌胃后根据需要,于不同时段在兔耳中央动脉采血,无菌分离血清,经 0.45 n m、0.2 u m双层微孔滤膜过滤除菌,置.40oC低温冰箱保存各用。然后用购自CCTCC的人脐静脉内皮细胞培养至3.5代,将第3代至第5代血管内皮细胞以含15%小牛血清的DMEM培养液调成sxm‘个l毫升的细胞悬液,以100VV孔接种于96孔培养板中,于37’C 5%CO。温箱中饱湿静置培养48小时,更换无血清的DMEM培养液,使细胞同步化12小时,每孔加入100 VI不同时相采集的空白兔血清或高剂量含药血清,每组均设8个平行孔,总体积为 200 P V孔,置 37’C5%COZ温箱中饱湿静置培养 36 ’J’时,每孔加入 sing/thl的MTT溶液20川,继续培养4小时以进行显色反应。以 50O/DMF--0%SDS 00 of终止反应,室温静置过夜。待孔内蓝色结晶完全溶解后置酶标仪上测波……   
[关键词]:骨性关节炎;实验研究;含药血清;血管内皮细胞;外固定支架;骨炎定
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:广州中医药大学2002年