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丰产鲫败血症病原菌豚鼠气单胞菌CSS-4-2的快速检测和免疫效果研究

谢凤

  丰产鲫败血症病原菌豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)CSS-4-2灭活菌株免疫纯种新西兰白兔后,制备免疫血清的凝集效价为640。应用Dot-ELISA法、间接荧光抗体染色法和玻片凝集法对CSS-4-2菌株的全菌抗原进行检测,最低检出水平分别为10cells/ml、10~5 cells/ml、10~8 cells/ml。通过对22尾人工感染CSS-4-2菌株死亡或有明显症状丰产鲫的肝、脾、肾组织进行检测,Dot-ELISA法检测匀浆上清液的阳性检出率为97%;玻片凝集法检测分离菌的阳性检出率为100%。而对12尾人工感染CSS-4-2菌株未显症状丰产鲫的肝、脾、肾组织进行检测,Dot-ELISA法检测匀浆上清液的阳性检出率为25%;玻片凝集法检测分离菌的阳性检出率为80.5%。荧光抗体染色法测出呈现荧光数目与CSS4-2菌悬液浓度存在一定的相关性,菌悬液浓度大的,呈现荧光数目越多;反之则少。总之,三种免疫检测方法不仅可检测死亡或症状明显的丰产鲫,而且还可检测症状不明显的丰产鲫或病菌携带者。应用Dot-ELISA法研究不同来源的水体和其他常见鱼类致病菌对CSS-4-2菌株检测的影响,发现pH7.4PBS缓冲液可提高Dot-ELISA法的最低检出水平;嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)会发生影响检测结果的交叉反应;荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)对检测结果无影响。菌体攻毒丰产鲫和草鱼试验表明CSS-4-2菌株对丰产鲫和草鱼都有致病性,但死亡或发病草鱼表现的症状不如丰产鲫明显,其发病机理可能存在一定的差异。超滤菌液攻毒试验表明CSS-4-2菌株滤液不引起丰产鲫和草鱼发病或死亡,致病因子可能不是外毒素。在水温25-32℃时,加热灭活全菌疫苗腹腔注射免疫丰产鲫,免疫后10d,血清凝集效价最高为88;但免疫保护率在免疫后 30 d达到最高,CSS4-2疫苗H左剂组为 11O,CSS4-2疫苗组为80%。以后逐渐下降,免疫后40 d,其血清凝集效价0:C%*-2疫苗H左剂组免疫保护率为20O/,CSS-4-2疫苗组为10%。加热灭活全菌疫苗在4C下保存gd,其免疫保护率仅为30%。……   
[关键词]:CSS-4-2菌株;细菌性败血症;免疫检测;Dot-ELISA;荧光抗体;染色技术;玻片凝集试验;免疫防治
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华南师范大学2002年