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眼眶横纹肌肉瘤多药耐药机制的研究

李玉皓

  目的建立横纹肌肉瘤耐药模型,分析多药耐药相关标志mdr1、mrp的表达,了解P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)在眼眶横纹肌肉瘤组织中的关系及临床意义,为阐明眼眶横纹肌肉瘤多药耐药(MDR)机理、改善化疗方案、判断预后及逆转耐药提供理论依据和临床实际参考。方法1.以长春新碱(VCR)为诱导剂,浓度递增法对人横纹肌肉瘤细胞系RD细胞在体外进行诱导实验,建立耐VCR的横纹肌肉瘤耐药细胞系RD/VCR。2.细胞计数法分析细胞的生长曲线,MTT法检测药物敏感性,光学显微镜和电子显微镜观察耐药前后细胞的形态学变化。RT-PCR法定量分析RD、RD/VCR细胞中mdr1和mrp基因表达水平,免疫组化法检测RD、RD/VCR细胞中P-gp、MRP的表达。3.免疫组化法检测42例眼眶横纹肌肉瘤组织和10例正常眼眶组织中P-gp、MRP的表达状况。结果1.RD/VCR细胞对长春新碱、阿霉素(ADM)、鬼臼乙叉甙(VP16)和放线菌素D(DAC)交叉耐药,对氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂DDP)无明显耐药性。RD/VCR细胞的群体倍增时间与RD细胞无显著差异,其形态学变化体现在超微结构上。2.RD/VCR细胞有mdr和pmRNA较高表达,P-gp、MRP表达阳性;RD细胞mdrmRNA低表达,pmnvA、P唱p、MRP表达阴性。3.P名p、MRP在眼眶横纹肌肉瘤组织中的表达阳性率分别为38.10%和54.76%,显著高于正常眼眶组织中;二0*495,*二0*004):卜gp、MRP表达与年龄、性别、组织学类型、分期无关:复发组P-pp示 MRP 的阳 性表达率显著高于奶发组(p;-0*078,pZ=00 186);P-gp表达与MAI,表达间未见相关性。结论1.VCR可诱导横纹肌肉瘤细胞产生多药耐药,其机制与mdr /P-gp和mrp/MRP表达有关,在形态学研究中,电镜观察不容忽视。2.眼眶横纹肌肉瘤组织的获得性耐药与Pgp、MRP过表达有关,但两蛋白在耐药中各有作用,检测Pgp. MRP的表达对判断预后有参考价值。……   
[关键词]:横纹肌肉瘤;眼眶;多药耐药;长春新碱
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:天津医科大学2002年