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三七多糖的分离纯化及免疫活性的研究

王健

  三七(Panax notoginsen Bark F.H.Chen.)经乙醇脱脂,沸水提取,乙醇沉淀,中性酶结合Sevag法脱蛋白,DEAE-Sepharose Fast Flow和CM-Sepharose FastFlow离子交换层析,Sephadex G-200凝胶过滤层析,得到纯化的三七多糖Ⅱa、Ⅱb(PNPSⅡa、Ⅱb)。PNPSⅡb经旋光度测定和Sephadex G-200分子筛鉴定为均一组分。红外光谱分析发现具有典型的多糖特征吸收峰。PNPSⅡb的单糖组成为阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,其相对平均分子量为20,700。纯化的三七多糖PNPSⅡa、Ⅱb体外对小鼠淋巴细胞的增殖功能具有双向调节作用,即在低浓度时能单独促进正常小鼠脾淋巴细胞的增殖,而在高浓度时呈现抑制作用。如加入PHA(一类T细胞刺激剂),低浓度时的刺激效果更明显。比较而言,这两种多糖体外对小鼠胸腺淋巴细胞的增殖功能无明显调节作用。细胞周期分析亦表明PNPSⅡb在一定浓度范围内使小鼠脾细胞中分裂期的细胞数目增多,促进细胞的增殖,高浓度时可阻断脾细胞的分裂,抑制其增殖;PNPSⅡb体外单独对小鼠胸腺细胞的增殖能力无刺激作用。此外,PNPSⅡb体外能显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的水平。在体内及体外两种条件下,研究PNPSⅡ对免疫抑制小鼠淋巴细胞增殖功能的影响,结果发现:PNPSⅡ体内对环磷酰胺造成的免疫抑制小鼠淋巴细胞的增殖功能有恢复作用;PNPSⅡb体外能对抗异丙肾上腺素(ISO)、地塞米松(DEX)对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用。由此提示,PNPSⅡb是一种免疫活性多糖,通过对机体免疫系统的调节作用,增强机体的免疫功能。其具体的免疫调节作用机制有待进一步研究。……   
[关键词]:三七多糖;纯化;免疫调节;白介素2(IL-2);细胞周期
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:浙江大学2001年