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低温胁迫对草鱼ZC-7901细胞系和淡水白鲳CBS细胞系某些细胞功能影响的研究

徐德立

  本文以培养的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)吻端细胞系ZC-7901和淡水白鲳(Colossoma brachypomum)吻端细胞系CBS为模型,研究低温胁迫对其细胞膜流动性、钙离子水平、ATP酶、丙二醛(MDA)含量、超氧化物阴离子(O2- )水平以及抗氧化酶系统的影响,以期探讨它们与细胞耐寒性的关系。与对照(ZC-7901,28℃;CBS,37℃)相比,2-3℃低温胁迫6h、12h、24h、48h、72h时,草鱼ZC-7901细胞的微粘度(η)分别是对照的1.110、0.926、0.726、0.646、0.696倍;脂质流动性为0.862、1.118、1.610、1.927、1.716倍;细胞膜的流动性为0.901、1.080、1.377、1.547、1.435倍。而在8℃低温胁迫下淡水白鲳CBS细胞的微粘度(η)为对照的1.068、0.905、0.937、1.024、1.071倍;脂质流动性为0.912、1.154、1.098、0.966、0.908倍;细胞膜的流动性为0.937、1.105、1.068、0.976、0.934倍。结果提示在低温胁迫开始较短时间(6h)内,草鱼细胞和淡水白鲳细胞膜流动性均下降,草鱼细胞随着低温时间的延长,膜流动性开始增高,低温48h时,达到最高,随后又下降,但仍高于对照。而淡水白鲳细胞在低温胁迫12h时膜流动性达到最大值,随低温时间延长,膜流动性下降,在低温胁迫48h时膜流动性低于对照,低温胁迫72h时膜流动性更低。可见在低温胁迫下草鱼细胞仍能保持合适的流动性,而淡水白鲳只在较短时间内保持一定的流动性。草鱼ZC-7901细胞在2-3℃低温胁迫6h,钙离子(Ca2+)水平即升高,低温胁迫12h时,Ca2’水平达到峰值。随着低温时间的延长,Ca2’水平开始下降,在低温48h时,Ca2+/’水平比正常时的稍高,在低温处理72h时,Ca2’水平稍低于正常水平。淡水白鲳细胞在8℃低温处理6h,Ca2’水平同样升高,低温处理至12h时,C/’水平达到峰值,低温处理24h时Ca2’水平又下降,但仍高于正常水平。但随着低温时间的延长,Ca2’水平又增加。可见草鱼细胞内的Ca2’在低温胁迫时仍能保持一种稳态平衡,而淡水白鲳在较短时间(24h)内能保持钙的稳态平衡,但随着低温时间的延长,这种平衡遭到破坏。与对照相比,低温胁迫6h、12h、24h、48h、72h时,草鱼ZC-7901细胞的MDA含量分别为对照组的1.40、1.75、1.36、1.31、1.27倍,低温胁迫12h时,MDA含量达到最高;其O2—水平在低温胁迫6h时达到最高,然后逐渐下降,但惭 仁 人 沓 林十含 伍《大仍稍高于对照组。淡水白鸥CBS细胞内MDA含量分别是对照的l.06d.14、l.22。1.26、1.25倍;其0。水平低温胁迫6h时达最高,12h时下降,但随低温胁迫时间的延长,其水平又逐渐升高并高出对照组较多。在同样条件处理下,草鱼ZC-7901细胞的ATP酶活力分别为对照组的0.522。0.896、豆.246、3.716、12.455.10.873倍,力入放线菌素 D(终浓度 0.lpg/ml)与瞟吟霉素(终浓度 lpg/ml)后再低温胁迫 48h,对 ATP酶活力的抑制率分别为50.8%和64.3%:CBS细胞ATP酶活力分别为对照的0.710、0.567、0.805、0.832、0899、0.808倍。ZC-7901细胞SOD酶活力为对照的0.892、1.5、l二5、1.26、1.22倍;CAT酶活力为 0.913、2.27、6.73、1.78、1.13倍;POD活力为 0.8093、0.9048、1.5、l刀05、l刀04倍;GSH-PX酶活力为0.604、1.3、l刀8、l刀7、0.987倍。SOD及GSH-PX酶活力在低温胁迫12h时达到最大值;而CAT和POD酶活力在低温胁迫24h时达到最大值。所有这4种酶在低温胁迫6h时酶活力均降至最低。……