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中华绒螯蟹“颤抖病”病原的鉴定及免疫学检测方法的建立

孙学强

  中华绒螯蟹(Eriocheir Sinesis),俗称河蟹,肉味鲜美,营养丰富,是一种重要的水产经济动物。近年来随着河蟹规模养殖的发展,病害也日益严重,其中尤以新出现的河蟹“颤抖病”危害最为突出。本研究以从江苏省宝应市采集的患“颤抖病”濒死的河蟹,用健康的中华绒螯蟹进行人工复制试验,经过连传两代的人工复制试验并结合电镜观察,确定其病原为一种55~65nm的有囊膜的病毒。采用Sepharose 4B柱层析方法从人工复制发病的病蟹的组织中,分离纯化到该病毒,负染后电镜观察进一步发现该病毒有清晰的纤突结构,并且具有多形性,用纯化病毒进行致病性试验,结果显示纯化病毒对锯齿华溪蟹(Sipopotamon denticulatam简称石蟹)也有致病性。以纯化病毒采用常规免疫学方法免疫家兔和山羊得到两种抗血清,建立了检测中华绒螯蟹“颤抖病”病毒的ELISA双抗体夹心法,用此方法检测样本144份,包括来自长江水域的野生河蟹、人工复制发病的河蟹、1999年和2000年从江苏采集的自然发病的病蟹及市场购买河蟹。结果显示,病蟹和市场购买河蟹的阳性率为66.7%~100%,人工复制病蟹和纯化病毒致病性试验中的病毒组、病料组石蟹为100%,来自长江水域的健康河蟹及纯化病毒致病性试验中的阴性对照石蟹均为0。表明建立的方法可以用于检测河蟹“颤抖病”的病原。……   
[关键词]:中华绒蛰蟹;颤抖病;人工复制;病毒
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京农业大学2001年