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氟虫腈免疫分析研究

董健

  本文采用氟虫腈(F)及其一种类似物(FH)作为半抗原,分别通过碳化二亚胺法(EDC)和戊二醛法把氟虫腈偶联到载体蛋白上,通过活性酯法把FH偶联到载体蛋白上,作为人工抗原。经核酸-蛋白分析仪扫描鉴定偶联物后,采用性剂和长程免疫策略,免疫新西兰大白兔。结果在编号为FH2934、FH2962、F2895的大白兔体内产生了特异性抗体,用间接ELISA测定其效价分别为:102,400、52,400、52,400,其中检现测低限(LLQ)最低达0.2ppb。本文进一步研究了几个生理生化因子对氟虫腈免疫分析的影响,优化分析条件。建立了FH—BSA的同源间接竞争性酶联免疫的氟虫腈残留分析方法。优化的免疫分析方法在高离子强度、中性pH值、没有去污剂(Twecn-20)的条件下,蒸馏水基质中I_(50)=17.95ppb,检测低限(LLQ)为0.06556ppb;田水基质中I_(50)=16.80ppb,检测低限(LLQ)为0.03620ppb。I_(50)和LLQ与没有优化的相比,均降低1个数量级左右。FH2934的抗体对丙酮、四氢呋喃的耐受能力弱,对乙腈的耐受能力较高,但有有机溶剂存在时,检测的背景值均增高。……   
[关键词]:氟虫睛;人工半抗原;免疫分析;免疫优化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京农业大学2001年