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超临界CO_2萃取猪肺表面活性物质及其化学成分分析

李雁

  肺表面活性物质(PS)是一种肺特异性的以磷脂为主要成分的脂蛋白复合物,最主要功能是降低肺泡表面张力,是维持正常呼吸功能的重要物质。PS不仅在呼吸窘迫综合征,也在其它肺部疾病的发病及进展中起着重要作用。外源性PS替代治疗已证明是呼吸窘迫综合征的有效治疗手段,在其它肺部疾病的治疗中也具有潜在的应用价值。目前,PS制剂的制备方法繁琐,产量、纯度低,存在有机溶剂污染,成本高,限制了它的在临床的广泛应用。建立一种简便、高效、安全的提取制备PS的方法具有重要实用价值。超临界流体萃取技术(SFE)是以超临界流体作为萃取剂的一项新型分离技术,具有快速、自动化操作、影响因素易于控制、不使用或少使用有机溶剂等优点。以二氧化碳为超临界流体,特别适合于热敏性、脂溶性、高沸点化合物,如磷脂等成分的分离提取。本研究成功运用SFE-CO_2技术萃取猪肺表面活性物质(PPS)。该法以猪肺支气管肺泡灌洗液为原料,首先经低温高速离心获得PPS粗品,再以SFE-CO_2技术去除其中大部分中性脂质等低极性成分,最后进一步萃取提纯磷脂成分。采用正交试验设计,分析影响PPS中中性脂质成分萃取效率的因素依次为革取时间、压力、温度。改性剂剂量对革取效率的影响无显著性意义。选取去除PPS中中性脂质的优化条件为革取压力45MPa,温度50oC,时间sh。革取 PPS中磷脂成分的单因素分析显示,以氯仿-甲醇门:l,V/v)为改性剂革取效率最高。磷脂的革取效率随压力、改性剂剂量、静态革取时间增加而增加,40~55℃范围内,茬取温度与茉取效率不成直线正相关关系。较大改性剂剂量的条件下,动态革取时间对革取效率影响不大。选取苯取PPS中磷脂的优化条件是:压力55MPa,温度55℃,以乙醇为改性剂,改性剂剂量为1.og尔,静态革取20min,动态革取3h。本法所得产物磷脂含量为89.76土 2刀 1%。经高效液相色谱分析,磷月酞胆碱占总磷脂92.97土2.370。产物中甘油三酯占2.44土0.96%,胆固醇占6.57士1.55%,不含蛋白质。该研究对利用SFE技术制备大然PS制剂的产业化生产具有重要参考价值。……   
[关键词]:肺表面活性物质;磷脂;超临界流体萃取;高效液相色谱;薄层层析;正交试验
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:第一军医大学2001年