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天然丝素蛋白的酶水解研究

陈杰

  本文在比较几种蛋白酶水解丝素效果的基础上,用茚三酮比色法和SDS-PAGE凝胶电泳法,详细研究了水解效果最好的弹性蛋白酶水解丝素过程中,温度、pH值、酶用量、底物浓度以及水解时间对反应速度、水解程度的影响,确定了酶促反应的一些催化特性:最适温度为45℃;最适pH为8.5;动力学常数K_m值为4.3mg/ml。另外,用氨基酸分析、红外光谱、热分析以及X衍射等手段对酶解产物的组成和结构特点作了分析。结果表明,丝素经弹性蛋白酶水解后,产生少量的沉淀(Cp),这部分分子以β折叠构象为主,呈紧密的结晶聚集态;水溶部分(Cs)与再生丝素溶液相似,是完全无规卷曲的结构。同时,两部分氨基酸的组成是有较大差异的,简单氨基酸(Gly、Ala、Ser)在沉淀部分含量很高,达90%;而带有较大侧基的氨基酸(Tyr、Phe)在水溶部分含量增加,为15%左右。……   
[关键词]:丝素;弹性蛋白酶;酶水解;水解产物
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:苏州大学2001年