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AFLP技术在香牙蕉种质资源鉴别与分类研究中的应用

于晓英

  香蕉的栽培品种繁多,据统计全世界约有300多个,按照法国分类学家克委刚分类,可分为中国矮脚香蕉、大香蕉类和煮食蕉类。我国传统将香蕉品种分为香牙蕉、大蕉和粉蕉(米蕉)三大类。其中栽培面积最大的主栽品种群是香牙蕉(Musa AAA Group Cavendish),由于蕉类植物特殊的生物生态学特性(如多倍体、无性繁殖及试管苗变异率高、营养性结实,小染色体等),目前国际国内对香牙蕉的分类比较混乱,没有统一、完善的分类标准。长期以来,对香牙蕉品种间的历史演化、亲缘关系等都未能深入的进行研究,常有同物异名和同名异物的现象,这不但给蕉类作物的生产带来很大的损失,也严重影响了香牙蕉种质资源的合理利用及新品种的选育和推广。为建立一个准确、完善、统一的香牙蕉分类标准,在前人相关研究的基础上,作者于2000年2~12月在广东省农科院果树所新技术室采用AELP标记技术对广州国家种质香蕉圃的35份香牙蕉种质材料的遗传多样性、亲缘关系、分类标准、种质鉴定等进行了研究。研究结果表明:①香牙蕉的DNA提取时,以未展开幼叶DNA产率和纯度最高,所含蛋白质,小分子杂质最少,改良后的CTAB和SDS提取法均可用于香蕉AFLP分析时DNA的提取,但用SDS法提取时,需用氯仿—异戊醇(24∶1)多抽提1-2次以除去混在DNA中的生物大分子杂质,否则受到杂质污染的DNA模板不能形成清晰的AFLP指纹。③运用AFLP标记进行香牙蕉种质资源研究时,EcoRⅠACC+MseⅠCAT、EcoRⅠAAC+MseⅠCAT和EcoRⅠACC+MseⅠCAG三个引物对均获得了较好的多态性。其中以EcoRⅠACC+MseⅠCAT的引物对组合,扩增条带信号强度一致性好,条带分布均匀。④EcoRⅠACC+MseⅠCAT和引物EcoRⅠACC+MseⅠCAG对35个香牙蕉(Dwarf Carvendish)材料进行AFLP分析,共得到扩增位点107个,其中多态性位点84个,多态性位点比例达到78.5%,对35个材料的区分率达到100%。⑤根据基因组指纹图谱聚类分析,当相似系数为0.88的水平,可将供试的35个香牙蕉材料分为7类。⑥香牙蕉类的几内亚(B55)、苹果〈B59〉以及阳江矮(B61)三份种质材料实际上为同一个品种。⑦在应用EcoRⅠACC+MseⅠCAT,EcoRⅠACC+MseⅠCAG,EcoRⅠAAC+MseⅠCAT三对引物构建的香蕉AFLP指纹图谱中,供试的35个香牙蕉材料都有差异带或特异带,B58(滑蕉)、B51(龙选)、B37(东S.1)、B29(海红)、B42(泰国蕉)等品种的特征带尤为明显。……   
[关键词]:香牙蕉;种质资源;鉴别;分类;AFLP
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:湖南农业大学2001年