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高胆固醇血症引起听力下降的分子机制研究

赵辉

  本研究建立高胆固醇血症大鼠模型,利用分子生物学技术,分析高胆固醇血症对听力及对听觉器官线粒体DNA缺失突变的影响,探讨高胆固醇血症造成听力下降的分子机理和线粒体DNA缺失突变在其中的意义。一、大鼠高胆固醇血症与听觉器官线粒体DNA~(4834)缺失的关系目的:探讨大鼠高胆固醇血症对听觉器官线粒体DNA~(4834)缺失以及听力下降的影响。方法:60只大鼠随机分为实验组(第一组3 8只)和对照组(第二组22只),第一组大鼠以高胆固醇饲料喂养,时间为6个月,建立高胆固醇血症大鼠模型;第二组则在相同条件下以普通饲料喂养。检测血清胆固醇和过氧化脂质水平,比较两组动物血脂变化;进行ABR检查,了解实验前后听阈上升程度并进行比较;随机取左侧耳蜗(第一组21份,第二组10份)和左侧蜗神经核(第一组27份,第二组13份)提取DNA,通过套式聚合酶链反应(nest polymerasechainreaction,nestPCR)技术,利用不同引物扩增正常和发生缺失突变的mtDNA片段,将PCR产物纯化后进行序列分析,检测听觉器官mtDNA~(4834)缺失率并进行统计分析。结果:1.高胆固醇饲料喂养可造成大鼠血清胆固醇和过氧化脂质水平明显升高(t检验,p<0.05);2.两组大鼠随年龄增加听阈均上升,高胆固醇血症大鼠的听阈上升更加明显,为38dB,和第二组(听阈上升28dB)的差异具有显著性(t检验,p<0.05);3.所有标本都扩增到正常mtDNA编码tRNA和NADH基因,并且高胆固醇血症大鼠听觉器官mtDNA~(4834)缺失发生率较第二组明显增高,其差异具有显著性(X~2检验,P<0.05)。结论:长期高胆固醇.且_军医进修学院硕士论文摘要 高胆固醇血症在听力下降和线粒体DNA缺失夹变中的意义血症可以加剧大鼠的听力下降,听觉器官 mtDNA4’“缺失可能是其作用机制之一。二、大鼠高胆固醇血症与噪声暴露对听觉器官线粒体DNA‘”‘缺失的。影响目的:探讨高胆固醇血症和噪声两种因素对大鼠听力及听觉器官线粒体DNA“’‘缺失的分别及协同影响。方法:18只大鼠随机分为高胆固醇血症+噪声暴露组(第三组)10只,单纯噪声暴露组(第四组)8只。第三组大鼠以高胆固醇饲料喂养,第四组则在以普通饲料喂养,6个月后暴露在112-11 6dBSPL白噪声环境中,每天4小时,连续40天。比较两组动物血脂变化并进行ABR检查动物听阈变化并进行比较;通过套式聚合酶链反应(nest pol”erase chain reaction,nest PCR)技术,利用不同引物扩增正常和发生缺失突变的mtDNA片段,将PCR产物纯化后进行序列分析,检测听觉器官mtDNA‘”‘缺失率并进行统计分析。结果:1.高胆固醇饲料喂养可造成第三组大鼠血清胆固醇升高,并使听阈上升更加明显,为38dB,和第H组(听阈上升28dB)的差异具有显著性k检验,p功.05);Z.予以噪声暴露后,两组动物听阈差距变小,其差异无统计学意义;3.高胆固醇血症+噪声暴露、高胆固醇血症和单纯噪声暴露组的大鼠听觉器官mtDNA‘”‘缺失发生率的差异没有显著性;但均较对照组明显增高,其差异具有显著性(X’检验,P<0刀5)。结论:噪声暴露和高胆固醇血症均可以引起大鼠的听力下降及听觉器官mtDNA“’‘缺失,噪声暴露的作用要强于高胆固醇血症。总之,本研究采用高胆固醇血症动物模型,利用套式PCR等分子生物学技术,明确了高胆固醇血症以及噪声暴露对听力的分别及协同.2.军医进修学院硕士论文摘要 高胆固醇血症在听力下降和线粒体DNA缺失突变中的意义作用,发现噪声暴露对听力的损害作用要强于高胆固醇血症,并分析了可能的机制。发现高胆固醇血症和噪声暴露的听力损伤作用中,均和听觉器官mtDNA‘”‘缺失有密切关系,本研究首次发现高胆固醇血症可使动物听觉器官mtDNA‘”‘缺失率明显增加。本研究结果提示:线粒体DNA缺失突变不仅和老化有关,还与高胆固醇血症和噪声暴露引起的听力下降有关。……   
[关键词]:高胆固醇;听觉器官;听力;听觉;mtDNA;听力下降;噪声暴露;血证;血症;分子机制
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:军医进修学院2001年