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烟草根际促生细菌的分离、筛选及防治黑胫病研究

顾金刚

  本文进行了烟草PGPR的初步研究。研究内容包括菌株的分离、筛选和菌种鉴定;用抗生素双标记法标记研究了在灭菌土和非灭菌土、有趋化介质和无趋化介质条件下的菌株定殖部位和定殖量关系以及标记菌株在土壤中消长动态,对4株根际细菌的趋化性进行了测定;进行了防病促生机制的初步研究。1.从云南省大理、楚雄、昆明、曲靖和玉溪等地采烟田土样13份,按外根际、根表和内根际在不同培养基上分离的方法,分离到根际细菌753株。采用平板拮抗的方法筛选出对Pythium sp.,Rhizoctonia solani和Phytophthora parasitica var.nicotianae Tucker有拮抗作用拮抗菌97株,进一步测定这些菌株对烟草发芽率和苗期生长的影响,筛选到促生细菌20株,再通过温室的盆栽试验筛选到7株,其中2株温室相对防病效果达到42.22%和37.78%。2.根据7株细菌的形态、培养特征和生理生化特性以及采用ID32GNATB细菌半自动鉴定系统,将RB-42、RB-78、RB-89鉴定为荧光假单胞杆菌-1(Pseudomonas fluorescens-1)、铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、荧光假单胞杆菌-2(Pseudomonasfluorescens-2),RB-1和RB-59分别鉴定为肠杆菌属的日勾维肠杆菌(Enterobacter gergoviae)和阴沟肠杆菌(Enterobacterclocae),R2鉴定为放射性土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter),R4鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.)。3.选用荧光假单胞杆菌RB-42和RB-89菌株进行利福平和硫酸链霉素的遗传双标记,标记菌株都能够成功定殖于烟株的根表,在灭菌土和加有趋化介质的条件下,菌株在根尖的定殖量都大于非灭菌土和不加趋化介质。菌株在根表的消长动态表明:标记菌株在烟苗根表的定殖量前期均有一个上升过程,随后逐渐下降,施入4周后,在烟苗根部仍有一定的定殖量。4.对RB-89、RB-42、R2、RB-1等4株细菌的趋化性测定表明,4株细菌对根部收集液的趋化值都大于1。选用RB-42和RB-89菌株进行对趋化物质的测定表明,对氨基酸的趋化性最强,对有机酸次之,对糖类物质最弱。对酪氨酸、脯氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸表现出较强的趋化性,对组表酸、苏氨酸无趋化性;菌株对有机酸的趋化性没有明显差别,RB叫2对乳酸的趋化性表现的比对其亡有机酸强.5.本文测定了代表苗株的作用机制。测定了菌株产HCN的能力,RB-4 2、RB-5 9和m-7 8具有较高勺产肌N的能力、结合筛选过程中的促生结果比较,发现产HCN能力高的菌株其促生结果也较好.RB-一2、RB-89菌株抑制致病疫霉菌丝的生长,通过镜检,经菌株处理后的菌丝,菌丝呈手指分叉状,粗缩、变短,分枝短粗、原生质浓缩,抱子囊也发生变形,灭菌的发酵液处理致病疫霉菌丝生长也有类似结果,抑制程度有强有弱。同时证明筛选出的菌株能促进烟株对P、K营养元素的吸收。根际细菌能够引起根际PH值的下降,能够使根际微环境中 Mn、Zn、P、L、Ca、Mg离子含量增高。通过本文的研究,发现筛选的根际细菌具有防病促生和提高烟株中K含量的能力。……   
[关键词]:PGPR菌株;鉴定;趋化性;防病促生机制;根分泌物
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业科学院2000年