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苹果斑点落叶病菌对戊唑醇敏感性测定及抗性风险评估

姚众

  苹果斑点落叶病(Alternaria alternata f. sp. mali)是苹果生产中的一种常发病害,该病可引起苹果树叶片大量脱落,严重影响苹果的产量和品质。目前,化学防治仍是生产上防治该病害的重要手段之一,但长期单一地使用一种杀菌剂,可能引起抗药性的产生。戊唑醇是一种广谱、高效、低毒的麦角甾醇生物合成抑制剂,对苹果斑点落叶病有较好的防效,在生产上使用量逐年加大,至今尚未见该病害对其产生抗药性的报道。因此,本研究测定了苹果斑点落叶病菌对戊唑醇的敏感性,并建立了敏感基线;在此基础上诱导了室内抗戊唑醇突变体,并对其适合度、生物学及生理生化特性等方面进行了研究,以期为戌唑醇在防治苹果斑点落叶病的合理使用上提供一定的理论指导。1、确立苹果斑点落叶病菌对戊唑醇的敏感基线。在山西省五个地区未使用过戊唑醇及同类药剂的果园中采集分离得到64株苹果斑点落叶病菌,对其敏感性进行测定。结果表明,其EC50值介于0.7687~2.6738μg/mL之间,平均值为(1.6224±0.5582)μg/mL,呈连续性单峰曲线,其EC50平均值可作为苹果斑点落叶病菌对戊唑醇的相对敏感基线。2、通过紫外诱导和药剂驯化共获得9株抗性突变体,其中通过紫外诱导获得低抗菌株6株,药剂驯化获得中抗菌株3株,说明在连续的药剂选择压力下可获得抗性水平较高的突变体。3、抗性突变体适合度测定结果显示,突变体菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率及分生孢子竞争力均低于敏感菌株,推断抗性突变体难以形成优势菌。在致病性测定中,突变体在无药情况下其致病力比敏感菌株弱,药剂胁迫下,突变体表现出一定的耐药性。遗传稳定性测定结果表明:部分突变体抗药性可稳定遗传;部分突变体在一定的药剂选择压力下敏感性变化不大,当无药剂胁迫时其敏感度上升。交互抗性研究结果表明,戊唑醇与同属三唑类杀菌剂的腈菌唑之间有一定程度的交互抗性。4、测定了不同营养条件、pH值、温度和湿度对苹果斑点落叶病菌抗感戊唑醇菌株生长的影响,结果显示,抗感菌株均以麦芽糖作为碳源、蛋白胨作为氮源的利用率最高;在中性偏酸或偏碱条件下生长较好;敏感菌株在温度为25-30℃范围内生长状况良好而抗性突变体最适宜生长温度为30℃;湿度较高适宜敏感菌株生长,但抗性突变体对湿度的适宜范围无明显规律变化。5、对抗感菌株渗透压敏感性、膜透性及麦角甾醇含量进行了测定。结果表明,抗感菌株对不同渗透压的敏感性变化没有规律性,且突变体抗性水平与渗透压敏感性之间没有直接联系;中抗菌株膜透性较敏感菌株增大,而低抗菌株膜透性较敏感菌株显著减小:HPLC法测定麦角甾醇含量结果显示,用药剂处理抗感菌株后,麦角甾醇含量从高到低依次是中抗菌株、低抗菌珠、敏感菌株,说明戊唑醇对敏感菌株体内的14a-去甲基化酶的抑制作用大于抗性突变体。……   
[关键词]:苹果斑点落叶病菌;戊唑醇;抗药性;适合度;生物学特性;生理生化特性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:山西农业大学2015年