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一株锦鲤腐皮病病原菌对常见消毒剂及其八种中草药的耐药性研究

辛伟涛

  随着水产养殖业的迅猛发展,水产药物的使用越来越普遍,药物的低降解速率致使养殖水体中长期保持着一定浓度的水产药物。病原菌长时间与含有这些药物的水溶液接触,会导致耐药性的产生,给水产动物疾病的防治带来一定的困难。水产动物主要有食用型和观赏型之分,锦鲤是一种常见的观赏性水产动物,在锦鲤养殖中,腐皮病是一种常见的疾病。会极大的降低其观赏性,所以对其腐皮病的防治尤为重要。本试验首先从患有腐皮病的锦鲤肝、脾、肾中分离、纯化病原细菌,经人工感染试验及VITEK-2全自动微生物鉴定及药敏分析仪鉴定,确定该病原为少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)。 为研究该病原菌对水产消毒剂的耐药性状况,本试验首先测定了甲醛、高锰酸钾、三氯异氰尿酸三种常用消毒剂对病原菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。在此基础上,将在MIC测定中存活的细菌接种于含有最小抑菌浓度消毒剂的培养液中再次培养,24h后重新测定其MIC和MBC,重复此过程至第15代,比较MIC和MBC的变化,进行耐药性检测试验;然后将此菌转接至普通营养肉汤培养基中连续传代培养至15代,测定并比较MIC和MBC变化,进行细菌对药物敏感性恢复检测试验。结果表明:细菌在亚致死浓度消毒剂培养液中长时间培养后,MIC和MBC均发生了明显的变化,甲醛、高锰酸钾、三氯异氰尿酸三种消毒剂对该病原菌的MIC分别由13.6μl/L、3.11mg/L、12mg/L上升至17.5μl/L、5.12mg/L、16mg/L,MBC分别由27μl/L、14.1mg/L、36mg/L上升至30.1μl/L、18.8mg/L、43mg/L;在药物敏感性恢复试验中,三种消毒剂的MIC和MBC分别降低至14.9μl/L、3.26mg/L、15mg/L和26.9μl/L、17.1mg/L、39mg/L。 试验还用类似的方法,研究了病原菌对乌梅、黄连、黄柏、白头翁、连翘、黄芩、五倍子、大黄8种水产常见中草药粗提液的耐药性状况,8种中草药对该病原菌的MIC分别为3.84mg/mL、3.96mg/mL、39.5mg/mL、6.56mg/mL、4.38mg/mL、5.11mg/mL、0.11mg/mL、1.08mg/mL,MBC分别为4.28mg/mL、4.38mg/mL、41.3mg/mL、7.08mg/mL、4.69mg/mL、5.73mg/mL、0.12mg/mL、1.1mg/mL。通过对实验结果进行差异性分析,证实该致病菌对8种中草药不易产生耐药性。 通过细菌对消毒剂的耐药性研究,说明细菌在含有亚致死浓度消毒剂的培养液中传代一段时间后能产生一定的耐药性,而在细菌对中草药的耐药性研究中不易产生耐药性。所以在水产养殖中,应科学合理的使用水产消毒剂,避免长期、不足量的使用消毒剂,提倡使用中草药类水产药物。……   
[关键词]:锦鲤;腐皮病;少动鞘氨醇单胞菌;消毒剂;中草药;耐药性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:天津农学院2012年