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长春花吲哚生物碱检测的方法及其分离纯化

张静

  长春花(Catharanthus roseus (L.) G. Don)是夹竹桃科(Apocynaceae)长春花属植物,在我国长江以南地区广为种植。长春花中含有大量的生物碱,其中萜类吲哚生物碱具有广谱抗肿瘤活性,能治疗多种癌症。对长春花体内各种生物碱的检测和提纯在长春花工业化生产上具有重要的理论和实践意义。 本研究采用RP-HPLC、超声波-甲醇提取和大孔树脂纯化建立了长春花5种吲哚生物碱的分析方法和样品制备方法,探讨了4种主要长春花生物碱提取工艺优化、大孔树脂纯化长春碱的方法,确定了富有特色的分离提取工艺。结果如下: 建立了长春花中文多灵、长春新碱、长春质碱、长春碱和蛇根碱等5种生物碱的检测方法。色谱条件:色谱柱采用Agilent C18ODS (250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:250 mL水-三乙胺(990:10,用磷酸调节pH 7.2)与750 mL甲醇-乙腈(4:1)混合:流速0.8 mL/min;进量样:20μL;柱温:21℃;检测波长:220 nm。 获得了文多灵、长春新碱、长春质碱和长春碱超声波-甲醇提取优化方法。提取条件如下:甲醇(pH 4.0);料液比:1:15;提取温度:45℃,提取时间:150 min;文多灵和长春质碱平均得分别为0.164%、0.081%。 确立了大孔吸附树脂富集纯化长春碱的条件:上样量比为树脂:样品=5:1,样品浓度0.5 mg/mL,洗脱液为95%乙醇溶液,比洗脱量为25 mL/g的饱和树脂,树脂再生条件为:先用盐酸浓度为5%淋洗,再用氢氧化钠浓度为3%洗至中性,然后用乙醇浸泡后,最后用大量蒸馏水洗至无醇味。树脂可循环利用4次,经再生后的树脂其吸附效果可达到原树脂吸附能力的90%以上。……   
[关键词]:反相高效液相色谱;文多灵;长春新碱;长春质碱;长春碱;蛇根碱
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京农业大学2010年