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山核桃蒲壳总生物碱的提取纯化及细胞毒性研究

张永钰

  本文以浙江临安产山核桃(Carya cathayensis Sarg.)蒲壳为研究对象,旨在对其中药用价值较高的生物碱成分进行提取与纯化工艺及细胞毒性的研究,为进一步的开发利用提供科学依据。 本论文采用传统浸提法、超声辅助提取法、微波辅助提取法从山核桃蒲壳中提取生物碱成分,以总生物碱得率为指标,分别通过正交试验考察最佳工艺,并将三种提取方法的最佳工艺进行了对比,结果表明微波辅助提取法的提取率高于传统浸提法和超声辅助提取法,最终确定提取条件为:室温浸泡24h,乙醇浓度60%,微波时间7min,微波功率520w,微波温度为30℃,生物碱得率为0.94%。 利用大孔树脂对总生物碱进行纯化。通过静态试验从三种树脂(D101、NKA-9、AB-8)中筛选出适合纯化山核桃蒲壳生物碱的树脂种类,研究结果表明,NKA-9型树脂综合性能最好。论文进一步通过单因素实验和正交实验优化了纯化工艺参数,包括上样液pH、洗脱液浓度和洗脱液用量三个因素。以生物碱的纯化倍数和固体得率为指标,通过极差分析和方差分析,最终确定纯化工艺为上样液pH为7.0,乙醇浓度为50%,乙醇用量为3BV,在此工艺下生物碱纯化倍数达3.173倍,固体得率为34.78%。 本论文采用MTT细胞计数法对山核桃蒲壳总生物碱进行细胞毒性研究。以细胞增殖抑制率为指标,探讨了总生物碱对HepG-2、K562、Bcap-37的增殖抑制作用及形态的影响。结果表明:山核桃蒲壳总生物碱对HepG-2、K562、Bcap-37的增殖有明显的抑制作用,对HepG-2细胞的抑制作用最为明显。IC50分别为:86.6ug/mL、293.4ug/mL、152.6ug/mL。……   
[关键词]:山核桃蒲壳;总生物碱;大孔树脂;细胞毒性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:浙江大学2011年