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致突变性检测方法—微量波动法的建立及应用研究

胡明阳

  随着工业化进程的加快,由化学物质和辐射等因子带来的环境问题日益突出,这些因子导致生物体的致突变效应,改变生物体的遗传物质,对生物体及其后代造成遗传性伤害。因此准确、快速地评价这些因子造成的生物危害是当代环境评价的一项重要工作。而传统的致突变性检测主要采用Ames法,该法手续繁琐,检测周期长,在实际应用中有一定的局限性,亟待进行改良。 本研究根据Ames法的基本原理,通过对培养、分析方法的改良,提出了Ames-微量波动法的最佳反应条件及其具体应用情况。微量波动法用液体培养基代替了传统Ames法的固体培养基,以观察培养液浊度或pH指示剂颜色的变化代替菌落计数,提高了实验的简便性和灵敏性。采用鼠伤寒沙门氏菌TA98菌株为测试菌株,二氨基芴为诱变物,通过分析菌液浓度,S9浓度,诱变物浓度的配比关系,确定了微量波动法的最佳反应条件,即微量波动法反应体系中的菌浓度和S9浓度分别为10ul/ml、20u1/ml。应用建立的方法,以TA98、TA97、TA100、TA102为测试菌株,对采自昆明市内的八条入滇河流的水质进行了验证性检测。并通过GC-MS检测和分析了八条入滇河流的复杂有机物组分,并从生物学角度初步揭示了水体污染物的致突变效应。 同时根据应用需要,用已建立的Ames-微量波动法对标准烟3R4F卷烟烟气冷凝物(TPM)进行了致突变性测试,以传统Ames平板测试法为对照对实验结果做了对比分析,结果表明以TA98、TA100为测试菌株微量波动法在传统Ames测试浓度下都呈较好线性关系,且好于传统的Ames平板法,但实验中也发现微量波动法过于灵敏,对于烟气TPM检测来讲,结果不够稳定。 由于烟草全烟气暴露能够更好的反应烟草烟气致突变性,通过跟踪国内外全烟气暴露研究报导,对全烟气暴露法的暴露体系做了全面的分析,应用自行开发的全烟气暴露装置,结合微量波动法,测试烟草全烟气致突变性,得到了适用于微量波动法的全烟气暴露的技术参数。……   
[关键词]:微量波动法;致突变性;Ames试验;污染水体;全烟气暴露
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:昆明理工大学2011年