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针灸足三里治疗肠易激综合征模型大鼠的作用机理研究

杜广中

  目的: 深入观察针灸足三里对感染后肠易激综合征(PI-IBS)模型大鼠的调节效应,探索针灸足三里不同结构及不同针灸方法对结肠高敏感和肠动力紊乱调节的作用机制及其科学方法。发掘文献记载的有创的瘢痕灸法,引入临床上具有成熟经验的射频热凝技术。 方法: 选用Wistar雌性大鼠,建立TNBS感染后腹泻型IBS大鼠模型,随机分为4组:模型组、模型+电针组、模型+瘢痕灸组和模型+射频针灸组以及空白对照组,其中电针与射频针灸的针尖位于足三里胫骨前肌、瘢痕灸位于局部皮肤。大鼠模型采用直肠TNBS灌肠,而对照组应用生理盐水灌肠。所有实验均在灌肠后第28天进行。电针,瘢痕灸,射频针灸均取后三里;其参数为电针采用HansLH202型电针治疗仪,左右双穴,刺入3mm,疏密波,2/15HZ,强度1mA,以大鼠双下肢轻微抖动为宜,15min/次,1次/d,连续6d;瘢痕灸右侧穴位,采用正四面体形、重40mg、边长6.26mm、比重1.38mg/m3艾炷,灸3壮,只灸1次;射频针灸右侧穴位,刺入3mm,时间60s+60s+40s+40s,参数75℃,阻抗640Ω,只射频1次。第33天检测内脏敏感性AWR积分,全胃肠传输功能,结肠纵行肌条平均张力、最大振幅、平均频率,酶联免疫吸附法测定血浆5-HT、SP、CGRP等,来观察针灸逆转肠道内脏高敏感和肠动力紊乱的调节效应,探索其作用机制,并对足三里穴不同结构及不同针灸方法加以比较。 结果: 1、AWR评分。模型组大于对照组(P<0.005);针灸足三里的不同结构后,均不同程度地降低评分(P<0.05-0.005);三组间没有显著差异(P>0.05);但射频针灸组在20mmHg直结肠球囊扩张时,没有显著改善(P>0.05)。 2、针灸后足三里局部组织病理。对照组基本正常;造模后出现部分肌纤维变性、肌纤维断裂;电针后发现少量炎细胞,间皮轻度增生;瘢痕灸后出现皮肤组织坏死并慢性炎症;射频针灸后致其局部组织坏死。 3、全胃肠传输功能。大鼠全胃肠活性炭黑便排出时间,模型组小于对照组(P<0.05);针灸足三里的不同结构后,均不同程度地延长了全胃肠活性炭黑便排出时间(P<0.05-0.01);三组间射频针灸(P<0.05)>瘢痕灸≥电针。 4、大鼠结肠纵行肌条平均张力。模型组大于对照组(P<0.05);针灸足三里的不同结构后,均不同程度地降低了大鼠结肠纵行肌条的平均张力(P<0.05-0.01),三组间没有显著差异(P>0.05)。Ach作用后,随着浓度累积,其平均张力逐渐增高;其中对照组与模型组在10-6以后,增高极显著(P<0.005);而针灸干预的三组,在10-5以后,始显著增高(P<0.05-0.005);三组间比较,没有显著差异。 5、大鼠结肠纵行肌条最大振幅。模型组大于对照组(P<0.005);针灸足三里的不同结构后,均不同程度地降低了大鼠结肠纵行肌条的最大振幅(P<0.05-0.01),三组间比较射频针灸组较电针、瘢痕灸组更显著降低(P<0.05)。 Ach作用后,随着浓度累积,其最大幅度逐渐增大,于10-8到最大值;随后,从10-7始肌条逐渐发生强制性收缩,其最大幅度逐渐减小。其中对照组与模型组在10-8,增高显著(P<0.025-0.005),在10-6以后直至10-4,显著减小(P<0.025-0.005);而针灸干预的三组,电针与瘢痕灸组10-5以后,显著减小(P<0.01-0.005),射频针灸组则在10-6以后,显著减小(P<0.05-0.005)。三组间比较,10-9、10-8射频针灸组显著低于电针与瘢痕灸组(P<0.025-0.01),10-7射频针灸组显著低于电针组(P<0.01),10-6、10-5三组间没有显著差异(P>0.05),10-4瘢痕灸和射频针灸法两组显著低于电针组(P<0.01)。 6、大鼠结肠纵行肌条平均频率。实验的5组间没有显著差异(P>0.05)。Ach作用后,随着浓度累积,其平均频率逐渐增大,基本在其10-6达到最大值(P>0.05);随后,从10-5始肌条逐渐发生强制性收缩,其频率逐渐减小;其中对照组在10-6以后极显著变化(P<0.005),模型组与电针、瘢痕灸三组只有10-4极显著变化(P<0.005),而射频针灸组只有变化趋势(P>0.05)。三组间比较,10-9至10-5三组间没有显著差异(P>0.05),10-4瘢痕灸和射频针灸两组显著低于电针组(P<0.025-0.005),瘢痕灸组与电针、射频针灸组间也有变化(P<0.025)。 7, PI-IBS模型大鼠血浆5-HT、SP水平显著增高,CGRP显著降低(P<0.01-0.005);针灸后三组均可显著降低5-HT、SP水平,显著增高CGRP水平(P<0.05-0.005);三组间5-HT、SP、CGRP比较没有明显差异。射频针灸组SP、CGRP水平与对照组比较有改善,但没有恢复到正常水平(P<0.05-0.025)。 8、不同质量艾炷灸的温度时间(mass-temperature-time,MTT)变化规律:艾炷燃烧的温度最大值及其时刻、艾灸持续时间,与艾炷质量成正相关。即随着艾炷质量的增加,其燃烧的温度最大值和艾灸持续时间也增大,出现温度最大值时刻的时间延长。 9、艾炷灸温度-时间(Temperature-time, TT)变化规律:呈单波峰,均有缓慢上升期、急速上升期、急速下降期和缓慢下降期。随着艾炷质量的增大,缓慢上升期和缓慢下降期均延长,其中缓慢下降期更明显;同时,波峰稳定时间随艾炷质量的增大而延长,呈现平台期。 结论: 1、针灸足三里可以有效逆转IBS结肠内脏高敏感和运动功能紊乱异常状态。 2、针灸足三里逆转IBS结肠运动功能紊乱主要通过调节其纵行肌条张力和振幅来实现,而频率没有显著变化。 3、针灸足三里解剖结构的皮肤,尤其是瘢痕灸可有效逆转IBS结肠内脏高敏感和运动功能紊乱,以前者更明显。 4、针灸足三里解剖结构的胫骨前肌,尤其是射频针灸可有效逆转IBS结肠运动功能紊乱和内脏高敏感,以前者更明显。 5、5-HT、SP和CGRP是针灸足三里调控IBS已经失常的神经-免疫-内分泌网络的中间介质。 6、艾炷灸燃烧的温度最大值及其时刻、艾灸持续时间,与其质量正相关;艾炷灸温度-时间变化规律:单波峰,有缓慢上升期、急速上升期、急速下降期和缓慢下降期。……   
[关键词]:感染后肠易激综合征;电针疗法;瘢痕灸;射频针灸;足三里
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:湖北中医药大学2011年