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细胞内蛋白质的动态光散射研究

张钰羚

  动态光散射技术是光散射技术的一个非常重要的分支,它通过测定由溶液中微粒的热布朗运动而引起散射光的微小频移及其角度依赖性可以确定溶液中分子或粒子的扩散系数、流体力学半径等动态力学参数,且通过计算机处理,还可以计算出体系的粒径分布的信息。该技术具有成本低、测量速度快、精度高、对样品无损坏等优点,在众多科研领域中得以广泛的应用。在生物医学上,由于癌症是生命的大敌,一直都是人们研究的热点。但是至今采用动态光散射技术对细胞内大分子的研究还甚少,因此本文开展了细胞内蛋白质的动态光散射研究。 本文首先用标准聚苯乙烯乳胶球溶液对实验中所用的广角激光光散射仪BI-200SM进行了标定,以确保后面实验的准确性。 由于不同浓度的溶液会对测量结果有一定的影响,因此在做细胞内蛋白的动态光散射测量之前,对不同浓度的牛血清白蛋白溶液进行了测量。结果显示,在一定浓度范围内,光强自相关函数曲线的稳定性随浓度增加而增加,而相关曲线的弛豫时间随着溶液浓度的增加而减小,粒径测量的相对误差也随着浓度的增加而逐渐减小。 应用动态光散射技术研究肝细胞和肝癌细胞内蛋白的光散射特性的区别,首先培养了足够的正常肝细胞和肝癌细胞,然后分别提取其总蛋白,用广角激光光散射仪对两种细胞内提出的蛋白溶液进行测量,从所得到光强、粒径和粒径分布等数据分析正常肝细胞和肝癌细胞内蛋白浓度相同时不同的光散射特性。结果显示,在同等浓度下,肝癌细胞内蛋白散射能力更强,平均粒径更大,分散程度不如正常肝细胞内蛋白好。两种细胞内蛋白溶液的粒径分布都比较均匀,呈双峰分布的趋势。同时两种细胞内蛋白粒径不受温度的影响,扩散系数随温度线性变化。这项研究有助于推动肝癌的早期诊断,同时说明动态光散射技术是生物大分子光散射特性的有效手段。……   
[关键词]:动态光散射;粒径;牛血清白蛋白;肝癌细胞
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:重庆大学2012年