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奥尼罗非鱼无乳链球菌的鉴定及免疫预防的初步研究

谭晶晶

  2009年海南地区鱼类链球菌病的发病率高达50%,死亡率在30%以上。2009年8月从海南省几个罗非鱼养殖场患病的奥尼罗非鱼(Oreochromis aureus×Oreochromis niloticus)中,分离到5株分别编号为LFY-08-23、LFY-08-23-2、LFY-08-23-3、LFY-08-23-4、LFY-08-23-5的菌株。经过对5株分离菌株进行生理生化特性鉴定、Biolog系统鉴定以及利用原核生物16S rRNA基因通用引物进行16S rRNA基因的克隆及序列分析,结果发现这5株菌株与无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的生理生化特性相似,LFY-08-23的16S rRNA基因克隆及序列分析结果与S. agalactiae (EF092913, DQ303183,AF459432)自然构成一个分支,相似性高达99.8%。因此可以确定S. agalactiae是海南罗非鱼链球菌病的主要病原。用分离的S. agalactiae LFY-08-23菌株对100g左右和30g左右的斑点叉尾鮰进行人工感染试验,结果表明该菌株对斑点叉尾鮰具有较强的致病力。分离到的S. agalactiae菌株对头孢氨噻肟、丙氟哌酸、利福平等13种药物高度敏感,对呋喃妥因、新生霉素、强力霉素等7种药物中度敏感,对卡那霉素、链霉素、磺胺异恶唑等5种药物不敏感。 本文将无乳链球菌的苯酚灭活苗(P-SA)、胞外产物优化灭活疫苗(ECP-modified bacterin)作为免疫原,分别接种斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)后,通过测定受免斑点叉尾鮰的凝集抗体效价、溶菌酶活性、血液白细胞吞噬活性以及活菌攻毒的方法,比较了斑点叉尾鮰对2种不同S. agalactiae疫苗的免疫应答。结果表明,对斑点叉尾鮰腹腔注射接种2种不同疫苗,与对照组相比,均能刺激受免斑点叉尾鮰较强的免疫应答,不同程度的提高了血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、血液白细胞吞噬活性。活菌攻毒后,对照组全部死亡,而两个免疫组均获得了不同程度的免疫保护率(RPS),胞外产物优化灭活疫苗组(ECP-modified bacterin)为70.0%,而单纯的苯酚灭活疫苗组(P-SA)为66.6%。……   
[关键词]:奥尼罗非鱼;无乳链球菌;鉴定;斑点叉尾鮰;灭活疫苗;胞外产物优化灭活疫苗;免疫应答
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2011年