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中国大鲵腐皮病病原学及组织病理学研究

王旭

  2009年9月,四川某中国大鲵(Andrias davidianus)人工养殖场出现以皮肤溃烂为主症的传染性疾病,以体表出现白斑,四肢溃烂和内脏器官充、出血为病变特征,该病发病率达80%,死亡率高达95%,对该养殖场造成了严重的经济损失。为弄清此次疫病病因,探讨其致病机理,本研究进行了大鲵腐皮病的病原学、病理学及初步防治等方面的研究。 对发病濒死大鲵的病变组织进行了病毒和寄生虫性病原的检查,排除了这两类病原感染的可能;同时进行了细菌分离,从20尾濒死大鲵的溃烂皮肤均各分离到1株优势菌,而从病变肝脏和肾脏均各分离到1株菌;对60株分离菌进行形态特征、理化特性研究表明,从溃烂组织分离到的优势菌和从病变内脏器官分离到的所有菌株均为同一种细菌;选取一株细菌(YA090911)进行16S rDNA序列的分子鉴定,将其序列上传至GenBank中(登录号:GU735964),并构建系统发育树;根据该菌的形态特征与理化特性,结合16S rDNA序列测定与系统发育分析结果,判定其为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。该菌对供试健康大鲵、斑点叉尾鮰和小白鼠均能致病致死,LD5o分别为5.4×106CFU/尾、3.9×105CFU/尾和2.0×106CFU/只。该菌对供试27种抗菌药物中的头孢美唑等6种高度敏感,对阿奇霉素和新霉素2种中度敏感,对氟哌酸等19种药物耐药,临床上选用高敏药物进行发病大鲵的治疗,该病得到了有效的控制。综合判定该菌即为导致此次大鲵发病的致病菌。 通过琼脂扩散法测定了大鲵源维氏气单胞菌胞外产物(ECP)的酶活性和溶血性,同时对其肠毒素毒性、细胞毒性及致病性进行了研究。结果表明,维氏气单胞菌胞外产物含有明胶酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等多种酶活性,且具有溶血性、肠毒素毒性和细胞毒性,对小白鼠和斑点叉尾鮰均有明显的致病性。 运用病理切片和HE染色技术对该菌引起的自然发病大鲵的肌肉、肝、肾、肺、肠道等器官的组织病理学变化进行观察。结果表明,肝脏可见小叶间组织和门管区内卵圆形细胞增殖,小叶内肝细胞广泛颗粒变性和水泡变性,淋巴细胞浸润,局部出现肝细胞溶解;肾脏粘膜上皮化脓坏死,形成溃疡,肾小管间质处有细胞浸润,有的肾小球纤维化;心较为严重的充血和出血,心肌纤维空泡变性,界限模糊;胰细胞颗粒变性、气球样变,少量细胞质空泡状;肺脏偶见充血;脾脏白髓和红髓比例失调,实质细胞坏死明显,胞核溶解或破碎,胞浆肿胀,崩解;肠道内肠绒毛溶解脱落,粘膜上皮脱落坏死严重,杯状细胞增殖,粘膜下小血管扩张充血;肌纤维蜡样坏死,肌细胞核浓缩凝固、深染、破碎。该菌能使中国大鲵的多个组织器官出现严重的病理变化而导致死亡。……   
[关键词]:中国大鲵;腐皮病;维氏气单胞菌;胞外产物;病理学观察
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:四川农业大学2011年