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黑木耳分级多糖制备及抗氧化研究

张宁

  黑木耳(A uricularia auricula),是一种真菌,又名木耳或光木耳。黑木耳是我国重要的药食同源的食用菌。其富含丰富的氨基酸、铁及多糖。其主要的活性成分为黑木耳多糖,具有很高的生物活性如:抗癌、降血脂和抗血凝功效。在生产利用与科研上,越来越受重视。 本文以黑木耳子实体为原料,用pH6、7、8磷酸盐缓冲溶液浸提黑木耳多糖,用乙醇浓度为100%分级黑木耳多糖。用ABTS+·、DPPH·、超氧自由基、羟基自由基、过氧化氢、金属离子螯合、还原力和脂质过氧化为指标测定多糖的体外抗氧化性。用8周昆明小鼠分成10组雌雄各半,每组10只,灌胃APG6、APG7、APG8多糖100mg/kg、150mg/kg、200 mg/kg,测试其体内SOD、CAT、GSH-PX、GSH. MDA含量,研究黑木分级耳多糖对小鼠体内抗氧化作用的影响。将330只小鼠随机分成11组,辐射模型组,对照组、给药组分别灌胃APG6、APG7、APG8多糖100 mg/kg、150mg/kg、200 mg/kg,14d时照射4.0Gy的60Coγ-射线建立辐射氧化损伤模型,14d后测定小鼠存活率,对免疫系统及抗氧化的影响。研究不同剂量黑木耳分级多糖对小鼠辐射、免疫、氧化系统作用的影响及对小鼠辐射损伤的保护作用,为以后抗氧化及抗辐射生物源药物开发与利用黑木耳多糖提供科学参考。主要结果如下: 1用pH6、7、8磷酸盐缓冲溶液提取黑木耳多糖,用100%乙醇分级,研究黑木耳分级多糖的分子量分布。APG6、APG7、APG8的多糖得率分别为:11.57%、19.46%、12.72%。多糖含量分别为:93.12%、89.43%、96.93%。高效液相色谱法对APG6、APG7、APG8进行纯度检测,APG6、APG7单一组分。质均分子量Mw分别为:4.3840×104、9.4335×103、4.4775×104。 2用制备的APG6、APG7、APG8多糖测定体外抗氧化。研究结果表明酸溶性黑木耳分级多糖APG6具有较强的清除ABTS、DPPH、金属离子螯合能力、还原能力,并且清除ABTS和DPPH自由基能力高于阳性对照Vc。碱溶性黑木耳分级多糖APG8具有较强的清除超氧自由基和羟基自由基能力。而中性黑木耳分级多糖APG7抗脂质过氧化抑制力高于其他多糖。 3 APG6、APG7、APG8做体内抗氧化小鼠试验。结果表明各剂量组多糖均能提高小鼠血清和肝组织中SOD、GSH-PX、GSH、CAT酶,降低MDA含量,随着剂量的增加效果越显著,其中APG8组效果最强。 4小鼠受照4.0Gy的60Coγ-射线,建立辐射损伤模型,分别从辐射指标、免疫功能、抗氧化功能等研究APG6、APG7、APG8对小鼠的辐射保护作用。各组多糖都能显著的提高小鼠存活率;减少由于辐射损伤引起的体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能下降,促进机体免疫功能恢复,缩短免疫功能恢复时间;增强辐射损伤小鼠SOD、GSH-Px抗氧化酶的活力,降低MDA含量,减少自由基对机体的损伤,增强机体清除自由基的能力。APG8组辐射小鼠恢复效果最优。……   
[关键词]:黑木耳分级多糖;制备;抗氧化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:东北林业大学2011年