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大高良姜黄酮的提取、分离纯化及抗氧化作用研究

牛付阁

  大高良姜为姜科多年生草本植物大高良姜(Alpinia Galangal Willd)的根茎,均为野生,是一种重要的植物类药材,有暖胃,散寒,止痛等功效。目前对大高良姜中的辛辣成分1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的研究比较多,而对其中所含的黄酮类化合物的研究却未见报道。本试验以药材市场购得的大高良姜为原料,采用正交试验和二次旋转回归试验优化了大高良姜黄酮提取工艺;利用聚酰胺柱层析技术对大高良姜黄酮进行了分离纯化,并对纯化的组分进行了抗氧化试验,为大高良姜的开发和利用提供了一定的理论依据。主要试验结果如下: (1)采用乙醇为溶剂提取了大高良姜黄酮类成分,主要对提取时间、提取温度、料液比和乙醇浓度四个单因素进行了研究,在单因素试验的基础上,通过正交试验确定的最佳提取条件为:提取时间4h,提取温度70℃,料液比1:40,乙醇浓度60%,在此条件下黄酮的提取率为35.84mg/g。 (2)利用纤维素酶辅助提取大高良姜黄酮,研究了加酶量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值四个因素的影响,在此基础上通过响应曲面法建立了纤维素酶辅助提取大高良姜黄酮的二次旋转回归模型,模型方程为:Y=50.08+1.78A+1.39B+1.79C+1.888D-0.25AB-1.08AC-0.75 AD+0.800E-003 BC+0.82BD+0.46CD-4.26A2-2.90B2-3.68C2-3.00D2,最后优化参数为:加酶量30.0U/mL,酶解温度56.6℃,pH值5.14,酶解时间1.71h.在此条件下黄酮的提取率为50.86mg/g。 (3)大高良姜黄酮提取物用不同溶剂萃取分组后得到乙酸乙酯萃取物,氯仿萃取物,正丁醇萃取物和水相残留物,对乙酸乙酯萃取部分用聚酰胺层析柱分离纯化,对分离得到的单体用高效液相色谱进行定量分析,最后得到的3个纯度较高的化合物,利用红外光谱和核磁共振谱进行了结构分析。 (4)研究了大高良姜黄酮对羟基自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除能力,结果显示:乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、氯仿萃取物和乙醇提取物对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基都有一定的清除作用,清除作用都比BHT的要高,但均低于Vc。清除率大小顺序为:在清除DPPH自由基体系中Vc>水相残留物>氯仿萃取物≈乙醇提取物>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>BHT;在清除超氧阴离子体系中Vc>乙醇提取物>水相残留物>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物>氯仿萃取物;在清除羟基自由基体系中Vc>水相残留物≈正丁醇萃取物>乙醇提取物>氯仿萃取物>乙酸乙酯萃取物>BHT。说明大高良姜黄酮具有一定的抗氧化作用。……   
[关键词]:大高良姜;黄酮;提取;分离纯化;抗氧化作用
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:陕西师范大学2011年