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桑树资源中1-脱氧野尻霉素的含量测定及桑叶、桑枝和蚕沙中1-脱氧野尻霉素等多羟基生物碱的提取纯化技术研究

宋婕

  多羟基生物碱类a-糖苷酶抑制剂是一系列糖环上的氧被氮原子取代的衍生物,因其结构类似于糖,能够竞争性地抑制体内的α-糖苷酶,从而有效的降低餐后血糖,对于糖尿病的治疗及保健均有重要作用。桑科(Moraceae)桑属(Morus)植物桑是这种多羟基生物碱类a-糖苷酶抑制剂主要来源植物,其含量最多的此类α-糖苷酶抑制剂为1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin, DNJ)。DNJ除了能用于治疗II型糖尿病、肥胖症外,还具有抗病毒及抗HIV病毒、抗肿瘤转移等作用,高效低毒,具有优越的保健食用及药用价值。由于我国桑品种繁多,分布广,因此为了能够有效的利用桑树资源中的DNJ,为DNJ的产业化提供参考,本文建立了一种稳定、简便、可靠的测定桑树资源中DNJ含量的方法以及此类多羟基生物碱有效的提取纯化方法。 一、桑植株中DNJ的含量测定 本论文用HPLC-ELSD法分别对三株野桑(鸡桑,Morus australis)的叶、枝韧皮部、枝木质部、嫩枝(一年生)、嫩茎(一年生)、老茎木质部(两年以上)根皮部、根木质部以及三株家桑(白桑,Morus alba L)中的叶、枝皮部、枝木质部等部位进行了DNJ含量测定,另外还对不同产地的桑葚、桑白皮、桑叶(白桑,Morus alba L)以及不同时间采集的桑叶(白桑,Morus alba L)进行了DNJ含量测定。该方法采用TSKgel Amide-80色谱柱,(4.6 mm×250 mm,5μm),使用乙腈-水(84:16,v/v)为流动相,水中含6.5 mM醋酸铵;流速为1.00 mL/min;柱温:30℃; ELSD漂移管温度为55℃,载气流速为3.2L/min, Gain值为8,进样量10μL。DNJ在0.505μg~20.2μg呈良好的线性关系。仪器精密度试验、重复性试验的RSD均不大于2.0%,24小时内的稳定性为1.37%,平均回收率为94.95%,RSD=1.98,(n=5)。结果表明,本论文所建立的含量测定方法准确度高、重现性好,能快速检测桑树资源及类似植物中1-脱氧野尻霉素的含量。 二、蚕沙、桑叶、桑枝中的DNJ的提取分离及多羟基生物总碱的提取纯化工艺研究 利用732型强酸性阳离子树脂、201×7型强碱性阴离子树脂,HD-2弱酸性阳离子树脂、大孔树脂、Sephadex LH-20、醇沉等多种手段,从桑叶、桑枝、蚕沙中均分离出了DNJ及Fagomine纯品,得到了其含有的多羟基生物总碱,并有效地进行了纯化。……   
[关键词]:1-脱氧野尻霉素;α-糖苷酶抑制剂;多羟基生物碱;蒸发光检测;
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:暨南大学2011年