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拟南芥TUA2基因参与ABA胁迫下种子萌发过程的研究

刘海浩

  微管蛋白是一种在真核细胞中普遍表达的蛋白,由α微管蛋白(TUA)和β微管蛋白(TUB)组成的微管蛋白异二聚体构成。在拟南芥中共有6种不同的TUA基因亚型和9种不同的TUB基因亚型。许多研究证实,不同的微管蛋白基因亚型在特定的发育阶段或组织细胞中高效表达,随着外界环境胁迫表达量也会发生变化。因此,微管蛋白基因不仅仅是持家基因,也参与众多的信号应答反应。 本研究以TUA2基因亚型表达变化的突变体为材料。利用反向遗传学的方法,运用遗传转化,Tail PCR,半定量PCR等技术进行TUA2参与ABA胁迫下种子萌发过程的研究。 主要结果如下: 1.通过生理检测我们在若干个T-DNA插入突变体中发现了一个对ABA敏感的突变体。运用Tail PCR的方法找到了T-DNA的插入位点位于TUA2基因上游启动子区,并发现该位点的插入导致突变体中TUA2基因表达量提高。另外我们在SALK库也找到了相应位点的突变体。并通过遗传转化的方法得到了三种不同株系的TUA基因超表达体。 2.构建了TUA2基因的亚细胞定位转基因表达载体,运用基因枪转化的方法将TUA2基因和GFP融合基因在洋葱表皮瞬时表达,结果显示TUA2主要在细胞膜上分布。 3.通过对ABA胁迫下种子萌发率的检测发现TUA2基因突变体,超表达体均出现了种子萌发的延迟。推测TUA2可能参与了ABA对种子萌发的调控过程。 4.通过RT-PCR的方法对ABA途径相关基因表达量进行分析的结果显示,与野生型相比突变体的HAB和ABI基因在ABA处理下的表达量明显降低,暗示了TUA2可能参与了ABA信号系统的负调控过程。……   
[关键词]:拟南芥(Arabidopsis thaliana);α微管蛋白(TUA);脱落酸(ABA)
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河北农业大学2011年