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麻蝇全蛋白提取及凝集素的纯化鉴定

陈卫华

  麻蝇是一种开发利用价值极高的昆虫生物资源,它不仅是一种很有前途的廉价、优质动物蛋白源,而且经深加后可获得多种有效成分,具有较大的发展潜力,可开发成医药、保健品、生化制剂及化工产品,并应用于癌症、艾滋病等难治病的治疗,是近年来研究的一个热点和亮点。本论文对麻蝇全蛋白提取和凝集素纯化鉴定进行了系统研究,得到较完整的全蛋白提取物及高纯度凝集素单一蛋白;并对麻蝇全蛋白电泳图谱、凝集素进行了初步分析。 实验目的:建立麻蝇全蛋白质的提取方法和合理的提取方案,获得麻蝇全蛋白纯品,为制作麻蝇全蛋白电泳图谱创造条件,为麻蝇蛋白质组学研究积累基础数据。进行麻蝇凝集素的纯化与鉴定研究,获得高纯度麻蝇凝集素,为综合开发和利用麻蝇资源打下基础,为其它昆虫蛋白资源的开发利用建立可资借鉴的方案。 实验方法:在预备试验的基础上,根据麻蝇蛋白的组成特点,分别用盐溶、醇溶、碱提等方法从脱脂麻蝇粉中分离提取清蛋白、小分子肽、球蛋白、醇溶蛋白和碱溶性蛋白等几类蛋白,并测定蛋白质含量,采用正交实验等技术,优化提取条件,设计麻蝇全蛋白提取方案,获得纯度较高的麻蝇全蛋白,用于制作麻蝇全蛋白电泳图谱。采用亲和层析法和戊二醛法纯化凝集素,通过SDS—PAGE凝胶电泳鉴定与分析了凝集素的理化性质与生物活性。 实验结果:脱脂麻蝇粉蛋白质的主要成分是清蛋白、球蛋白和小分子肽;大部分蛋白质的分子量分部在32-86.2KD之间;蛋白质得率为44.94%,回收率为85.6%,Tris-饱和酚法获得的麻蝇全蛋白电泳图谱较为理想。亲和层析法所获凝集素的效价为256;麻蝇凝集素的相对分子质量为82.9KD。……   
[关键词]:麻蝇;全蛋白;凝集素;纯化;鉴定
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:江西师范大学2010年